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【动物造模-药效评价】-大鼠剥夺性弱视模型

  大鼠的视觉系统虽不如猴和猫那样接近人类,但仍有一定的立体视范围,其视觉发育较猫快2~3倍,2~8周龄为其视觉发育的敏感期。大鼠价格便宜,容易饲养,动物的选择可以实现标准化从而减少误差。故大鼠是目前选用视觉发育研究最多的实验动物,特别是对于视觉中枢的研究则更为广泛。

  大鼠弱视模型可采用Wista大鼠或者SD大鼠,一般都选用2周龄大鼠。入选大鼠按0.2ml/kg体重腹腔注射10%水合氯醛或者乙醚吸入麻醉,应用0.3%碘伏严格消毒大鼠欲术眼眼睑后分别剪除上、下眼睑睑缘1.5~2.0mm,将眼睑创缘对合良好后用5-0丝线分层缝合皮下和皮肤组织2~3针,以封闭术眼。也可直接缝合大鼠实验眼。术后3d内给予青霉素10万U/kg腹腔注射以预防感染,1周内应每日消毒及检查创口,避免感染造成缝线脱落。在自然光线下饲养4周,但每日光照时间不少于12h。1个月后可成功造成大鼠剥夺性弱视模型。特殊实验要求时也可在幼鼠出生后第3天实施视觉剥夺手术。

  4周后所有造模大鼠行VEP检测判定造模情况。先将造模大鼠形觉剥夺眼粘连的眼睑剪开,充分暴露眼球角膜,与正常组大鼠一起置于暗室内暗适应30min,按0.3ml/kg体重腹腔注射10%水合氯醛麻醉,双眼结膜囊内滴入美多丽眼液充分散大瞳孔,剪除大鼠前囟、双侧乳突和双侧头颅后极部对应视皮质部位处的体毛。将大鼠置固定仪上,分别检测实验组大鼠形觉剥夺造模眼和未造模眼P-VEP。检查一眼时,用不透明黑色眼罩遮盖另一眼。调整受检眼使视网膜中央对准中央视标,角膜顶点距视屏25cm。采用棋盘方格图形翻转刺激。平均亮度50cd/m2,面积相当于视角120×120,空间频率0.16cpd,时间频率1Hz,对比度60%,带通0.5~100Hz,叠加100次,阻抗<2kΩ。

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