动物造模,药效评价,充血性心力衰竭 z-bio 2024-07-23 123

　　1.造模材料  动物：新西兰大白兔，16～20周龄，雄性，体重2.1～3.3kg；药物：速眠新，青霉素，氯胺酮/地西泮；器械：BL-420生物机能实验系统。

　　2.造模方法  兔子称重后肌内注射速眠新0.1ml/kg，待麻醉满意后将兔子仰位固定在手术台上。胸部剃毛，常规消毒后铺无菌洞巾。沿胸骨正中线切开皮肤、肌肉，紧贴胸骨左缘剪开第2～3或3～4肋软骨(小心避免发生气胸)，小拉钩轻轻撑开胸腔，注意不要损伤胸膜，用小弯钳轻提并小心剪开心包，悬吊心包在皮下充分暴露心脏。用无齿镊轻轻提起左心耳，沿左心耳向左找到左冠状动脉起始部，于左冠状动脉前降支距主动脉根部冠状动脉开口3mm处结扎冠状动脉，肉眼观察结扎后冠状动脉供血区域颜色变暗，搏动减弱，如无此改变则再次结扎血管，以确保足够数量的心肌发生坏死，然后接肢导及胸导联以50mm/s的速度描记体表心电图，心电图出现ST段呈弓背向上型抬高以确定心肌梗死(myocardial infarction, MI)模型成功。关胸前心包腔留置14号头皮针导管接10ml注射器，关胸后抽出心包腔内残留气体并拔除。肌内注射哌拉西林1g预防伤口感染。手术后将兔子侧卧保暖，等待麻醉苏醒后放回兔笼。术后3周心电图检查示冠状动脉结扎组相关导联均存在病理性0波，而假手术组则无异常改变，证明心梗模型成功。

　　3.造模原理  由于心肌梗死后会导致心力衰竭，故采用结扎冠状动脉的方法造模。

　　4.造模后变化  术后3周心力衰竭组较假手术组左心室舒张内径(left ventricular diastolic dimension, LVDD)、左心室收缩末期内径(left ventricular end-systolic dimension,  LVSD)显著增加，而左心室短轴缩短率(shortening fraction, FS)、左心室射血分数(left ventricular ejection fraction, LVEF)则显著减少，表明心力衰竭组左室收缩功能不全。术后15周结果与术后3周结果相同。

　　血流动力学检查示心力衰竭组较假手术组左室最大上升速率和下降速率减低而伴以舒张末压升高和收缩末压下降，表明冠状动脉结扎后兔心急梗死后重构心肌心功能不全。

　　梗死面积心脏大体观察。假手术组心肌无梗死；而心力衰竭组，梗死灶主要分布在左室前壁和侧壁，且均为透壁性梗死，乳头肌水平梗死面积平均为22.3％(19.0％～30.6％)。

　　5.注意事项  麻醉时，因兔个体差异大，速眠新剂量应个体化，密切观察呼吸、心跳、角膜反射及对疼痛的反应，否则易导致呼吸抑制，甚至死亡；手术开胸应选择胸骨中线处切开，然后紧贴胸骨左缘剪断2～3或3～4根肋骨，这样可以很好地避免损伤胸膜而不造成气胸，若术中一旦发生气胸，应迅速完成实验，关闭胸腔并在患侧胸腔抽气，以助肺部复张；左心耳组织较脆，牵拉左心耳时用力应松紧适度，太松无法很好地暴露前降支，太紧对左心耳损伤较大，有时会夹碎左心耳，导致兔子死亡；结扎后应做心电图，出现sT段呈弓背向上型抬高才能确定急性心肌梗死(MI)模型制备成功，如不出现可继续第2次再结扎，但一般不超过3次，以免对心肌组织损伤过大；结扎时要注意冠状动脉前降支的变异，以免漏扎导致模型不成功；术中严格遵守无菌操作，适当静脉补液40～60ml(5％GNS)。术后一次性给予抗生素预防感染，动物成活率高。