动物造模,药效评价,异种动物原位移植骨肿瘤 z-bio 2024-07-18 175

　　【造模机制】通常将瘤块或细胞接种于裸鼠皮下，肿瘤继续生长，能模拟人恶性肿瘤成瘤后的过程，成瘤率高，成瘤时间均一，瘤体大小和重量容易测量，容易进行基础和临床研究。但是，肿瘤移植物的生长侵袭及转移行为除了与肿瘤本身的生物学特性有关外，还与肿瘤的移植部位密切相关。皮下接种使肿瘤细胞脱离了其起源组织器官的微环境，在实验中移植瘤的某些生物学行为常不同于原患者身上的恶性肿瘤的行为，属异位移植；与之相对应的原位移植就为一种新型肿瘤移植方法，越来越多地得到人们的认可，它是将人类肿瘤接种到与肿瘤原发部位相对应的宿主器官组织内，使其获得与人体肿瘤相似的微环境，提供多种促进肿瘤生长的内源性生长因子。

　　【造模方法】

　　1．细胞悬液法  取对数生长期UMR-106细胞，胰酶消化后用PBS洗涤两遍，去掉残余的血清，最后用无血清培养基RPMl l640调整细胞体积及浓度，4周雌性BALB/c-nu/nu裸小鼠以乌拉坦麻醉，乌拉坦用量为600μl/g，接种前常规消毒局部皮肤，于手术显微镜下暴露股骨外侧，掀起0.15mm×0.15mm大小的骨皮质，将细胞悬液缓慢注入髓腔后，复位骨瓣，以骨蜡封口，缝合筋膜及皮肤，整个过程在无菌净化室内操作。

　　2．组织块法  取对数生长期UMR-106细胞，调整细胞浓度，按照2×1000000个细胞/只接种于4周雌性裸小鼠背部皮下，待4周后移植瘤增大到2.0cm×2.0cm×1.5cm。取无坏死瘤组织，置于 PRMI 1640培养基中，用眼科剪将其剪成直径约为0.3mm大小的瘤组织块备用。取6周雌性裸鼠，方法同上打开股骨外侧，将修整为体积均一的瘤组织块送人骨髓腔，复位骨瓣，缝合。通常造膜第3周才呈现出明显的生长趋势。

　　【模型特点】从植入瘤组织块或接种细胞悬液后第2周开始，骨局部开始增大，呈膨胀性增大，挤压周围组织，外观皮肤紫红色，静脉怒张。种植3～4周后X线片显示骨质破坏及周围软组织浸润，6周后出现病理骨折。光镜下移植瘤细胞大小不一，形态各异，核大深染，核浆比例倒置，呈巢状分布。

　　【模型的评估和应用】该模型能够很好地模拟骨肉瘤本来的生长微环境，具有肿瘤缺血坏死现象少、肺部转移率高、转移灶密集等优点。主要用于肿瘤细胞生长、侵袭的生物学特性研究，用于骨肉瘤的定位显像诊断，保肢治疗；用于导向治疗载体和化疗药物敏感性筛选方面的研究。