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【动物实验】-bcl-2基因修饰神经干细胞移植修复大鼠脊髓损伤

  目的:探讨bcl-2基因修饰的神经干细胞移植对脊髓损伤大鼠神经功能障碍恢复的影响。

  方法:将大鼠神经干细胞进行体外培养,并使用Ad-EGFP作为载体来介导B淋巴母细胞瘤2基因(bcl-2)基因转染到神经干细胞中。可以分为3组:对照组和阴性转染组。 ,Bcl-2转染组。 Western blot检测转染前后神经干细胞中bcl-2蛋白的表达。采用改良的Allen打击法建立大鼠急性脊髓损伤模型,随机分为对照组,NSC组,bcl-2-NSC组85只成年雌性SD大鼠,共72只。 ,分成24只大鼠/组。通过BBB评分和倾斜板测试评估运动功能。建模7天后,采用RT-PCR和Western blot检测脊髓损伤区域周围HSP27和c-fos基因表达,并采用TUNEL法检测细胞凋亡。建立模型四周后,取样进行病理切片HE染色和荧光显微镜观察,观察EGFP标记的NSC的存活和分布,并通过SEP和MEP观察大鼠神经电生理恢复。

  结果:将bcl-2基因转染到大鼠神经干细胞后,bcl-2基因和蛋白质水平高于对照组和阴性转染组(PNSC组 →对照组)。转染组表达。两组之间的差异是显着的(P\u003c0.05)。

  结论:Ad-EGFP被用作介导B淋巴瘤2基因(bcl-2)基因转移的载体,神经干细胞可促进体外培养的大鼠神经干细胞的增殖Bcl-2基因修饰的神经干细胞移植可促进脊髓损伤大鼠的神经突触再生,并增加脊髓损伤区域的HSP27它可以减少脊髓损伤区域神经细胞的表达,bcl-2基因的表达和凋亡,改善大鼠四肢的运动功能和电生理功能。

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