动物造模,药效评价,糖尿病视网膜病变 z-bio 2024-07-08 233

　　【造模机制】糖尿病时，视网膜暴露于高浓度的血浆葡萄糖中，细胞内游离葡萄糖堆积，激活山梨醇代谢的关键酶——醛糖还原酶，山梨醇产生加速，山梨醇聚积到视网膜毛细血管的周细胞、视网膜的Müller细胞和某些特殊的细胞成分。毛细血管壁内山梨醇堆积，导致血管壁内长期处于高渗状态，刺激基底膜进行性增厚，使它的支架作用、细胞附着和滤过功能失常，可造成周细胞死亡、微动脉瘤形成以及渗出性和出血改变。

　　【造模方法】链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的动物模型：链脲霉素冰浴溶解于0.1mmol/L的柠檬酸一柠檬酸钠缓冲液中。柠檬酸2.1g加双蒸水至100ml为A液，称取柠檬酸三钠2.94g加双蒸水至100ml为B液；取A液28ml及B液22ml混合，混合液用双蒸水稀释至100ml即为柠檬酸缓冲液，测pH约4.5，置于冰浴备用。与STZ配成10g/L STZ-DM溶液，按55mg/kg腹腔注射，给药前大鼠禁食水12小时。整个过程无菌操作，注射后30分钟恢复进食。72小时后采尾血测量血糖。10周STZ-DM Sprague-Dawley大鼠可作为接近人类早期BDR的动物模型以用于DR的相关实验研究。

　　【模型特点】造模成功早期，ERG就开始出现变化，ERG波幅值有先增高后下降的趋势；OPs波首先表现为O2峰时值延长，后表现为OPs各子波幅值下降。病理观察，毛细血管基底膜增厚，内皮细胞指状突起、吞饮泡增多；周细胞、双极细胞以及神经节细胞线粒体肿胀、嵴脱落、空泡样变；视网膜感光细胞外节膜盘数量减少、间隙增宽；血管迂曲、毛细血管扩张。超微结构显示：视网膜各层均有镧颗粒渗入(图12-3)；视网膜毛细血管内皮细胞增生，基底膜增厚。

　　【模型评估和应用】STZ诱导的糖尿病视网膜动物模型，通过诱导胰腺产生大量的氧自由基从而造成β细胞损伤，导致血胰岛素下降和血糖升高，可模拟人类的胰岛素依赖型糖尿病模型。该造模方法简单经济、重复性好、成模率较高。所以目前，有绝大多数诱导的糖尿病视网膜动物模型采用STZ方法建立，但是值得注意的是建立起的糖尿病动物模型并不是均会发生的糖尿病视网膜病变。 STZ诱发的大鼠模型，造模时间为1～3天，观察周期多为1～6个月，短期内高血糖的动物是否均产生真正的DR，需要深入地观察。