动物造模,药效评价,血管性痴呆 z-bio 2024-07-02 261

　　1.造模材料  动物：纯系健康Wistar雄性大鼠，18～20月龄，体重(500±20)g；药物：10％乌拉坦(1g/kg)，硝普钠(25mg/kg)；器械：无创动脉夹。

　　2.造模方法  术前12h禁食水。以10％乌拉坦(1g/kg)腹腔注射麻醉后，消毒，颈正中切口，钝性分离双侧颈总动脉(common carotid artery, CCA)及神经，随即用无创动脉夹夹闭双侧CCA，10min后，再通10min，再夹闭10min，首次夹闭前给予腹腔注射硝普钠25mg/kg。再通后缝合伤口，放回笼中保温饲养，每只大鼠肌内注射青霉素20万U，连续5天，以防感染。假手术组仅分离双侧颈总动脉后缝合。

　　3.造模原理  由于脑缺血导致海马受损，从而造成血管性痴呆。

　　4.造模后一般变化  利用大鼠程控穿梭箱进行行为学检测发现，和假手术组电击次数(15.91±1.58)次、电击时间(73.45±6.20)s相比，造模组大鼠的电击次数(24.70±4.03)次、电击时间(105.50±10.82)s，有极显著差异。

　　5.造模后生化变化  假手术组和模型组大鼠的谷胱甘肽过氧物酶(glutathione peroxi-dase, GSH-Px)活力分别为(551±0.175)酶活力单位，(288±0.099)酶活力单位，有极显著差异，提示模型组GSH-Px活力降低。

　　6.造模后病理变化  海马区细胞凋亡观察：低倍镜下，HE染色后，可见模型组CA1区细胞排列松散，锥体组织缺乏，细胞模糊；凋亡细胞染色后，可见大量凋亡细胞。假手术组大鼠海马锥体细胞层结构紧密层次丰富，细胞线清晰可见；凋亡细胞染色后海马CA1区有少量凋亡细胞。

　　7.注意事项  手术器械严格消毒，防止手术感染，手术创伤应尽可能小，严格无菌操作。

　　术后大鼠应分开，等苏醒后3～5h才能合笼饲养，防止先醒的舔咬昏迷大鼠的伤口。饲养室内尽可能保持大鼠最适温度、湿度。