动物造模,药效评价 z-bio 2024-07-02 196

　　弓形虫是世界各地十分普遍的严重影响人类健康的一种人兽共患寄生性原虫。终宿主为猫类，中间宿主为200多种哺乳动物(包括人)和鸟类。弓形虫病有先天性、获得性和眼性(可为先天性，亦可为获得性)等三类，多数表现为隐性感染。先天性弓形虫病(通过胎盘传染引起)的危害尤为严重。在国内，刘涛等通过RH强毒株以不同途径、不同感染量对大鼠、小鼠和长爪沙鼠的感染性进行了研究后认为：小鼠和长爪沙鼠极为易感，感染后存活时间短，只能作为保种和获取大量抗原的良好动物。未成年大鼠对弓形虫同样易感，但其抵抗力明显强于小鼠和长爪沙鼠，但成活时间也不长，不能用作隐性感染动物模型。而成年大鼠感染后能存活3个月以上，70d后逐步进入隐性感染状态，故大鼠可以作为弓形虫隐性感染的动物模型；张杰等采用不同剂量冷冻复苏的人源国际标准株(RH株)刚地弓形虫速殖子，于不同妊娠时期接种小鼠，并用一定剂量的己烯雌酚(DES)处理后观察了其流产情况和胎仔脑组织感染情况，建立了弓形虫垂直传播小鼠动物模型。在国外，Roberts等对先天性弓形虫感染的鼠模型进行了研究，并认为：动物感染弓形虫后，其免疫力取决于动物种类，Swiss鼠的弓形虫病可以在代与代之间连续传播，而BALB/c小鼠和BALB/K小鼠的先天性弓形虫病只发生于母体妊娠期间的初次感染，妊娠前的感染可以使胎儿获得免疫力，这两种鼠的垂直传播情况与人类相似。

　　1.弓形虫隐性感染动物模型

　　(1)复制方法  弓形虫RH强毒株速殖子1×100000腹腔接种于大鼠，大鼠周龄为11～12周，体重为200～220g。

　　(2)模型特点  感染动物一般能成活3个月以上。IgM抗体从第10日开始逐步上升，到第70日达到高峰，以后逐步下降，而IgG从50d开始逐步上升，逐步代替大分子IgM。70d内仍存在弓形虫活动，70d后逐步进入隐性感染状态。    (3)比较医学  感染动物由于免疫力较强，所以70d后弓形虫在体内成囊进入隐性感染状态。这和大多数人类感染为隐性感染，呈无症状带虫状态，以包囊形式长期甚至终身潜伏于脑部组织、肌肉、视网膜及其他脏器相似。此造模动物可用于弓形虫对各系统的损害、药物筛选、弓形虫病的诊断等方面的研究。

　　2.弓形虫垂直传播动物模型

　　(1)复制方法  ①弓形虫速殖子1×100000个腹腔接种小鼠，72h后无菌抽洗小鼠腹腔液，离心、洗涤、过滤纯化，计数，用PBS配制成1×100000000个/L液氮中冷冻保存，复苏后用于接种。②选取BALB/c小鼠，8～10周龄。③准备DES。④处女鼠与雄鼠同笼交配，观察阴栓，发现阴栓之日作为妊娠第0日。妊娠第8日接种复苏后的弓形虫速殖子400个/只。⑤妊娠第10、13日，皮下注射DES 1mg/100g。

　　(2)模型特点  采用此方法建立的弓形虫垂直传播 BALB/c小鼠动物模型，可以达到使流产率控制在较低水平，又不会全部发生垂直传播。发生的垂直传播情况与人类相似。

　　(3)比较医学  弓形虫速殖子接种到小鼠体内，很容易引起小鼠的死亡。采用冷冻复苏后的速殖子接种孕鼠，可以降低小鼠的死亡。接种时间越早，接种剂量越多，出现全部流产的孕鼠个数越多。不同妊娠时间接种速殖子或口服包囊进行感染，影响小鼠的胎儿吸收和流产情况。妊娠期性激素特别是雌激素的作用，影响细胞免疫，从而影响妊娠期弓形虫感染结果。不同动物对弓形虫感染后的免疫力不同。此造模动物可用于先天性弓形虫病的防治研究。