动物造模,肺纤维化,药效评价 z-bio 2024-06-14 273

　　1.造模材料  动物：健康雌性Wistar大鼠，实验等级为二级，体重(220±20)g；器械：60Coγ射线发生器。

　　2.造模方法  用60Coγ射线进行全胸照射，其中照射野面积为4.5cm×4.0cm。将大鼠上至两腋窝、下至胸骨剑状突的位置对准此照射野，用10cm厚铅砖屏散装置屏蔽大鼠其余部分。照距为3m，剂量率为2.7Gy/min，剂量为30Gy。

　　3.造模原理  60Coγ射线导致动物肺纤维化。

　　4.造模后一般变化  用60Coγ射线对Wistar成年雌性大鼠进行30Gy全胸单次照射后，大约在第3周见动物胸背部照射野皮肤开始脱毛，鼻腔出现出血现象。约1个月左右胸背部照射野皮肤脱毛更加明显，并可在该处皮肤发生湿疹、红斑、糜烂和溃疡，鼻腔出血也更加严重。3个月后上述症状减轻，但鼻腔出血现象仍不时可见，被毛6个月以后见再生长现象。上述症状出现的同时，动物发生死亡，死亡从3周后开始可持续到照后3.5个月，但死亡高峰集中在照后1.5～2个月。合计死亡率为34.98％。

　　5.造模后病理变化  照后3～7天，大鼠肺脏及其他部位未见明显异常。照后2～3周，见肺脏表面和切面散在点状或斑点状出血。照射4周之后，见胸腔积少量或多量淡黄色或红黄色液体，肺脏充血、出血、肿胀，切面有大量泡沫样液体流出，肺体积增大、重量增加。肺重与体重之比也比正常对照动物明显增高，可达3％，最高达4.9％。照射2个月以后，肺脏的急性炎症性变化逐渐减退，3个月后明显减退，6个月后肺脏可见灰黄色或灰白色的绿豆大到蚕豆大的致密实变区，尤左、右肺上叶表现明显。

　　光镜所见：对照组大鼠肺组织学结构正常。照射组大鼠肺组织学变化初期表现为急性炎症变化，中后期则转变为亚急性或慢性进行性发展变化，可大致分为2个阶段4个期。早期即急性炎症期或渗出期，该期发生时段主要在照后2个月以内，表现为肺泡壁毛细血管和支气管周围血管充血、肺出血、间质水肿，肺泡腔积液并有红细胞、巨噬细胞、肺泡上皮细胞等聚积。中期为增生期，多见于照后2～3个月，表现为急性炎症开始逐渐消退，代之以细胞增生性变化，即肺泡壁增厚，肺泡腔变小，肺泡壁细胞成分增多，主要为成纤维细胞，此外尚可见巨噬细胞、淋巴细胞等。在血管周围、支气管周围等肺间质部分也可见成纤维细胞大量增生。此外，该期有些部位的间质可见有淋巴细胞显著增多。上述2期合称为疾病的第1阶段即放射性肺炎阶段。第3期(后期)为纤维化期，多见于照后3～9个月。该期主要表现为肺泡壁重度增厚，肺泡腔明显变小及至消失，肺泡壁以及支气管、血管周围等肺间质部分成纤维细胞尤其是纤维细胞明显增多，且在这些部位发生局灶性纤维化。第4期(晚期)为胶原化期，见于照后9～12个月。该期局部肺组织可完全被胶原组织所代替，肺泡腔极度狭窄甚至消失，细胞数目减少。后2期共同构成本病的第2个阶段，即进行性间质纤维化阶段。