动物造模,乳腺肿瘤模型 zi-bio 2024-03-13 424

　　目的 研究树鼩乳腺肿瘤发生、发展过程中代谢组学的变化，探讨机体代谢物质改变与肿瘤发生、发展的 密切关系，以期筛选出反映乳腺肿瘤病情进展的生物标志物。

　　方法 通过连续3次、每次间隔15 d的方式给20只树 鼩每只灌胃7，12-二甲基苯并蒽 （7，12-dimethylbenzoanthracene，DMBA） 0.15 mg/kg，并添加高脂高糖饲料，诱 导实验观察24个月或直至树鼩生成乳腺肿瘤。使用气相色谱-飞行时间质谱联用技术 （gas chromatography-timeof-flight mass spectrometry，GC-TOFMS） 对DMBA诱导发生乳腺肿瘤的树鼩、DMBA诱导未发生乳腺肿瘤的树 鼩以及未诱导正常树鼩 （12只） 的血清代谢物进行非靶向测定，通过主成分分析 （principal component analysis， PCA）、正交偏最小二乘法分析 （orthogonal partial least squares analysis，OPLS-DA） 等多维统计分析，进一步 结合t检验进行组间差异比较，以VIP＞1且P＜0.05的标准筛选差异性代谢物，并结合HMDB在线数据库对显著变 化的差异代谢物进行鉴定，最后应用京都基因与基因组百科全书 （Kyoto Encyclopedia of Genesand Genomes， KEGG） 通路数据库富集代谢相关基因调控通路。

　　结果 DMBA 诱导后树鼩的乳腺肿瘤发生率为 40% （8/20）。 DMBA造模成瘤组与正常对照组相比，树鼩血清中检测到有30种代谢差异产物，其中18种下调，12种上调，差异 均具有统计学意义 （VIP＞1，P＜0.05）；KEGG通路分析发现，谷氨酸代谢、甘油酯代谢、柠檬酸循环、丙氨酸代 谢这4个代谢通路发生显著改变。DMBA造模成瘤组与DMBA造模未成瘤组相比，检测到有18种代谢差异产物，其 中7种下调，11种上调，差异具有统计学意义 （VIP＞1，P＜0.05）；KEGG通路分析发现，柠檬酸循环、谷氨酸代 谢这2个代谢通路发生显著改变。DMBA造模未成瘤组与正常对照组相比，检测到有31种代谢差异产物，其中14种 下调，17种上调，差异具有统计学意义 （VIP＞1，P＜0.05）；KEGG通路分析发现，柠檬酸循环、谷氨酸代谢、甘 油酯代谢这3个代谢通路发生显著改变。

　　结论 代谢组学分析可展示乳腺肿瘤树鼩血清中代谢产物的变化特点，结 果提示谷氨酸代谢、甘油酯代谢、柠檬酸循环、丙氨酸代谢途径与高脂高糖饮食下DMBA诱导树鼩乳腺肿瘤的发生 与发展有相关性，这为进一步研究乳腺肿瘤发病的生物机制奠定了基础。