动物造模,肝纤维化 zi-bio 2024-02-18 464

　　1.造模材料  动物：4～5月龄日本大耳白兔，雌雄不限，体重(2.5±0.2)kg；药物：平阳霉素碘油乳剂。

　　2.造模方法  所有实验兔均于术前24h禁食，4h禁水。速眠新注射液0.8ml肌内注射麻醉，腹中线切口8cm长，进腹腔后，剪断小网膜(在兔身上实际为少量透明系膜组织)，于胃幽门上方找到肝门，可见明显的肝动脉搏动，走行朝向肝内，中途可见其发出胃十二指肠动脉，向幽门部走行，用5号半头皮针穿刺肝动脉成功后针头越过胃十二指肠动脉注药。其中假手术组注入0.4ml生理盐水；模型组注入0.2ml碘油+2.0mg平阳霉素+0.2ml生理盐水制成的混悬乳剂；注药后拔出针头用明胶海绵按压1min，确定无出血后关腹缝合。

　　3.造模原理  平阳霉素碘油乳剂(PLE)对血管内皮细胞存在非特异性抑制和破坏作用，这种作用被称之为“祛血管作用”。PLE进入肝脏后，由于碘油在正常肝组织中能停留近20天，使得平阳霉素得以缓慢释放，造成慢性肝损伤。

　　4.造模后变化  造模1周后，模型组肝脏表面外被白色被膜，肝缘欠锐利；2周后肝缘进一步变钝；4周时大体观与2周相仿；6周时肝脏边缘进一步变钝，肝表面凸凹不平；10周时肝脏表面可见一直径约1cm的硬化结节，质硬，切割质地如胶皮感；14周时大体观与10周相仿。假手术组兔肝缘锐利，表面光滑，色泽鲜亮。

　　造模1周后HE染色可见肝细胞水样变性，肿胀，肝索拥挤，肝窦充血，门管区大量淋巴细胞浸润；2周时HE染色肝细胞明显水样变性，胞质空亮，部分肝细胞可见嗜酸性改变，肝窦充血，汇管区大量淋巴细胞浸润：4周HE染色肝细胞仍有明显水样变，汇管区大量淋巴细胞浸润，纤维组织增生明显，小叶间隔增厚，肝窦充血；6周HE染色肝细胞水样变性较前减轻，汇管区纤维组织大量增生，向小叶内延伸扩展，形成分割包绕趋势，部分肝组织可见增生的纤维结缔组织重新分割包绕形成假小叶。10周光镜下肝组织呈广泛纤维化改变，部分区域的肝组织可见大片团状增生的纤维结缔组织，无明显肝细胞结构；14周时光镜下改变与10周相仿。假手术组肝细胞形态正常，肝索排列整齐，小叶结构清晰。

　　5.注意事项  术中严格采用无菌操作，以防感染。