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【动物造模】-先天肾阳虚证动物模型

  (1)复制方法  成年鼠,善叫凶狠的猫。饲养小鼠至75日龄时,按雌雄2:1交配,第4日晚取出雄鼠,第5日对实验鼠进行恐吓,将孕鼠直接置于猫笼之下,猫笼与鼠笼仅一网之隔,猫爪可触及雌鼠,每日上午、下午各恐吓2h,共14d,直至孕鼠分娩前1d为止。每次恐吓时喂1~2只雄鼠或非实验鼠给猫吃,增加恐吓的氛围。交配后第19日,母鼠陆续开始产仔,处死部分初生鼠,取睾丸作相关检查,余下动物饲养到75d处死,取睾丸作相关检查。

  (2)模型特点  子代雄鼠右睾丸进行HE染色观察到生精细胞的间质内多数水肿明显,有的生精细胞质内疏松肿胀,有的伴胞质内大小不等的空泡形成,在曲细精管管腔内精子生成减少,生精细胞的层数有上升趋势,标本在880μm3内生精细胞明显增加。子代鼠饲养到75日处死,受恐吓孕鼠所生的雄鼠的睾丸与体重之比无明显异常,左睾丸冷藏15d时取出,发现干湿与色泽上与正常者有差异,系数明显上升。冷冻60d后,对子代鼠的睾丸,再置于10%甲醛溶液中浸泡31d,制作切片后HE染色光镜下观察,生精小管中生精细胞层数4~5层,生精细胞排列不整齐,分布多少不匀,生精细胞的间质内明显水肿,并见生精细胞胞质多数有空泡变性,半数周界不清,有的呈现腐脱明显,还在生精小管管胞内出现少量散在巨噬细胞,个别形成多核巨细胞,管腔内精子生成明显减少,且分布不均。

  (3)比较医学  根据初生儿体弱瘦小属胎禀怯弱、肾精不足之胎怯的中医理论,筛选初生3d内、体重显著不足的动物,或利用中医恐伤肾理论用恐吓孕鼠造成子鼠先天肾虚。胎怯者机体宫内发育未成熟,先天禀赋不足。表现为生长发育迟缓,生理功能低下,其证候为脾肾两虚尤以肾虚为突出。研究发现胎怯模型存在垂体、甲状腺、肾上腺等内分泌失调,而恐吓孕鼠造成的子鼠先天肾虚存在行为学方面的异常。

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