动物造模,恐伤肾肾阳虚证动物模型 z-bio 2023-12-20 491

　　(1)复制方法  成年小鼠、猫、狗。猫吓鼠：将小鼠与猫关在同一大套笼里1或3周，一网之隔，使猫与鼠朝夕相处。1周者小鼠，每日上、下午各放2h，于实验7d后处死。3周者小鼠，将猫与鼠24h共处，在实验期内，每日上、下午各拿1只活鼠喂猫示众，于实验后第3周处死。人吓猫：每日上、下午恐吓各1次，每次0.5h左右，连续30d。爆竹吓狗：狗放在只能伸头转身的木圈里，前后左右四周木板上均钉上长锐钉，锐钉间距为10cm，每日下午2时在木圈上方放300响鞭炮，连续30d。观察动物的一般状况，动物处死后取睾丸、肾上腺、心、肝、脾、肺、肾、部分脑垂体、胃等组织块作病理形态学检查。

　　(2)模型特点  猫吓鼠：当与猫同处时，小鼠总表现惊慌失措，上窜下跳或争相躲藏，约10min之后才稍平静，但神态紧张，大喘粗气，猫时时有抓小白鼠的企图，小鼠表现出高度戒备状态。每当小鼠被猫抓到时，常发出临死的尖叫声，致使3周组的小白鼠惊恐万分，相互挤作一团，全身颤抖，1周后这种恐惧表现稍有减弱，但自由活动程度远不及正常小鼠。人吓猫：*初20d，猫每次见实验人员后即惊恐万分，上窜下跳，大喘粗气，不得安宁，直到实验人员离开现场为止，到实验结束前10d时，猫见实验人员后即从原兴奋状态转为抑制的木僵状态，甚至实验人员用木板抽打，亦毫不动弹，*后1周基本拒水、拒食，已奄奄一息。爆竹吓狗：实验狗对每次放爆竹时反应情况有所不同，有狗拼命吼叫，而有狗则拼命躲藏，四处碰钉子，3d后，狗的摄水、食量开始下降，有狗于放完爆竹后开始流泪，有狗每次只要有响声就狂叫不停，在实验2周后饮水、摄食量有恢复。

　　肉眼大体观察小鼠及猫的睾丸包膜完整，呈灰白色，体积略小，质地韧，切面均质、细；实验狗的睾丸切面质地硬；实验猫的肺有部分陈旧性出血斑块及部分肺气肿和肺不张。光镜下观察可见：1周组个别小鼠生精小管上皮细胞有空泡变性，3周组小鼠生精小管上皮腐脱、结构紊乱及细胞空泡变性，个别有巨细胞形成、伊红小滴、睾丸间质水肿及纤维化形成的中期病变；猫生精小管上皮腐脱及结构紊乱更严重，上皮层次减少，管腔内成熟精子数量减少，个别见巨细胞形成，上皮细胞内有较多空泡形成及细胞脱失，间质细胞PAS阳性物质减少，部分生精小管进入晚期表现，即生精小管管腔缩小、生精上皮层次明显减少、间质细胞相对增生等表现；狗睾丸生精小管上皮腐脱、结构紊乱，成熟精子数量减少，生精细胞内见空泡形成，间质轻度水肿等早、中期病变表现。电镜检查可见：1周组小鼠睾丸生精上皮细胞空泡形成，以精母细胞尤甚，胞质内线粒体肿胀变性，睾丸问质细胞胞质内线粒体大片肿胀变性；3周组小鼠睾丸生精上皮细胞结构松散，细胞内空泡变性，以精子细胞更甚，睾丸间质细胞胞质内线粒体变性，类脂质减少，脑垂体电镜下显示促性腺激素细胞等细胞的胞质内由于内质网高度扩张而充满大小不等空泡，线粒体肿胀变性，细胞核分叶及核溶等坏死改变，部分激素细胞内颗粒明显减少，并见有部分区域出血等表现。

　　(3)比较医学  中医情志致病理论中有“恐伤肾”、“恐惧而不解则伤精……精时自下”之说。沈雁等根据该理论建立惊恐伤肾肾虚证动物模型，主要有猫吓鼠、人吓猫及爆竹吓狗等方法，造成的病理损害以生殖腺损伤为*显著，类似的还有皮肤烧伤法、悬吊应激法等。该法利用长期恐惧刺激引起模型动物一系列心理、生理及病理上的反应，分析其发病机制可能是精神－二神经内分泌－效应器之问相互关系紊乱而导致结构功能与代谢上的病变。根据中医传统理论，这种方法造成的模型应该属于肾精虚损模型，至于能否因延长造模时间而发展为肾阳虚证还有待进一步探讨。