目的:探讨尼古丁对碘乙酸钠(MIA)诱导的骨关节炎软骨细胞凋亡的抑制作用。
方法:通过酶消化分离大鼠原代软骨细胞,并用10-8、10-7、10-6、10-5 mol/L尼古丁处理细胞48小时,然后从正常组中撤除实验其余4组用4μMMIA治疗24小时,并用烟碱治疗。 MTT法检测每组软骨细胞的活力,Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测每组软骨细胞的凋亡,光谱法检测每组软骨细胞中的含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶光度(Caspase3)活性;磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)活化和下游靶分子Bax和Bcl-2表达的蛋白质印迹分析。
结果:10-7、10-6 mol/L烟碱可显着提高大鼠软骨细胞的活力(P0.05)。 10-8,10-7,10-6mol/L尼古丁剂量依赖性地增加MIA诱导的大鼠软骨细胞活力并抑制MIA诱导的大鼠软骨细胞凋亡和Caspase3活性(P\u003c0.05); 10 -7,10-6 mol/L烟碱可增加PI3K表达和AKT磷酸化,下调并促进Bax表达,并上调Bcl-2表达。
结论:一定剂量的尼古丁可以显着抑制MIA诱导的大鼠软骨细胞凋亡,这可能与PI3K/AKT信号通路有关。