1.造模材料 动物:健康杂种犬,雌雄不限,体重14~23kg;药物:氯胺酮,维库溴铵;器械:可控式微电流刺激仪。
2.造模方法 肌内注射氯胺酮100~200mg麻醉犬。肌内注射维库溴铵0.1mg松弛犬气管平滑肌,气管插管后连接呼吸机并予心电监护。沿胸骨左缘第3、4肋骨间开胸,逐层打开至心包膜,制作心包吊床,清晰暴露左冠状动脉前降支血管。距离前降支开口约1.5cm处将正、负刺激电极间隔1cm分置前降支血管外膜,电流由小至大逐渐加强,刺激血管外膜15~20cm,间隔10min,心电监护显示心电稳定后,同部位再次予电流刺激20min至血管外膜颜色加深为止。观察无严重心律失常及出血等,逐层缝合关闭胸腔,置水封瓶胸腔引流。犬麻醉清醒后送回动物间喂养。平均刺激电流为115μA,电压为13.5V,时间平均为36.5min。
3.造模原理 采用微电流刺激仪刺激犬冠状动脉血管外膜导致冠状动脉内急性血栓形成建立犬急性心肌梗死模型。
4.造模后的病理变化 心肌酶学变化:电刺激冠状动脉后,血清肌酸激酶(creatine kinase, CK)和心肌型肌酸激酶同功酶(MB isoenzyme of creatine kinase, CKMB)明显升高,尤以电刺激后6h和24h升高明显,与实验前基础值相比较,差别有显著意义。
光镜观察:梗死灶内心肌纤维变性坏死,坏死心肌纤维肿胀断裂、均质化,纵纹及横纹消失,梗死区见有出血及含铁血黄素沉积,少量吞噬细胞浸润。透射电镜观察:心肌梗死区纤维明显坏死,肌丝断裂,z线消失,闰盘破坏,线粒体高度肿胀变性,嵴突破坏及消失,间质水肿。梗死区血管内皮肿胀,血管旁心肌变性,肌丝排列紊乱,线粒体肿胀变性,Z线模糊不清。
5.注意事项 手术器械严格消毒,防止手术感染,手术创伤应尽可能小,严格无菌操作。