动物造模,心肌梗死模型 z-bio 2023-10-31 729

　　1.造模材料  动物：幼猪，30～35kg，雌雄不限；药物：氯胺酮，戊巴比妥，阿托品，利多卡因，青霉素，硫酸阿米卡星。

　　2.造模方法  猪禁食8h。肌内注射氯胺酮10mg/kg诱导麻醉.将猪清洗干净后，固定四肢于特殊木板上，胸部、四肢局部去毛。心电监护采用I、V1、V3导联。用套管针在猪耳后大静脉处建立静脉通路，缓慢静脉推注5ml 3％戊巴比妥。0.5mg阿托品，以3L/min流量给氧。术中保持麻醉状态，每隔1h追加戊巴比妥2ml或视肢体运动情况给药。

　　常规消毒铺巾，取猪右侧腹股沟部位，1％利多卡因局部麻醉，切开皮肤，钝性分离暴露右侧股动脉。穿线结扎其远端，穿刺针小心刺入动脉，通过穿刺针迅速送入导丝，沿导丝送入6F动脉鞘管，随即弹丸式静脉注入肝素8000U，手术过程中每隔1h追加2000U。经动脉鞘管置入5F猪尾导管至左心室行左室造影。以5F左冠状动脉造影导管行左冠状动脉造影，随后将6F左冠大腔指引导管置于左主干开口，经该导管置入0.014英寸的经皮冠状动脉内成形术(percutaneous transcoronary angioplasty, PTCA)导丝至左前降支(LAD)远端。经导丝置入2.0mm或2.5mm的球囊(根据LAD直径大小选择)，以405.3～607.95kPa压力打开球囊，每次球囊充盈30s后放开以恢复血流，间隔5min重复充盈球囊，共预适应5次，观察球囊堵闭过程中动脉内压力、心电图ST-T变化及有无心律失常等，如出现频发室早、短阵室性心动过速或心室颤动等情况可考虑延长预适应时间。如无异常，则以405.3～607.95kPa气压打开球囊堵闭LAD，造影示球囊远端血流中断，持续120min之后，小心撤除球囊。再次造影观察血供情况，直至血管完全闭塞后退出鞘管，结扎血管止血。术中连续心电监护及氧气吸入，术后静脉注射青霉素240万U，手术切口处予硫酸阿米卡星局部注射预防感染。

　　3.造模原理  采用微创球囊冠状动脉堵闭建立动物心肌梗死模型。

　　4.造模后变化  堵闭术后当时造影提示LAD血管无血流出现，术后1个月造影显示LAD远端血管闭塞或明显变细伴血流缓慢。

　　LAD球囊堵闭后1min内即出现心电图改变，在I、V1、V3导联出现T波高尖、ST段抬高或压低，5min后I、V1、V3导联出现ST段明显抬高，并随着堵闭时间的延长ST段进一步升高，*终呈单向曲线。

　　5.造模后病理及生化变化  堵闭1h后，上述导联上出现坏死性Q波，此后持续存在，堵闭后1.5h开始出现血清心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I，cTn I)增高，平均12h达到峰值，72h后恢复术前水平。

　　模型建立1个月后处死动物，取出心脏，大体标本发现：多数有室壁瘤形成，室壁瘤区大致呈圆形，颜色苍白，境界分明，瘢痕组织较正常组织明显变薄，为透壁性梗死。梗死部位基本一致，多位于心尖部和左室前壁。病理切片显示疤痕处大量结缔组织增生，炎症细胞增生、血管钙化及闭塞。

　　6.注意事项  手术过程中出现*多的并发症为室性心律失常，包括室性期前收缩、室性心动过速及心室颤动，常发生于冠状动脉剐刚堵闭时或心肌再灌注时。对于单个室性期前收缩，一般不予处理，但需严密观察，并做好各种抢救准备，一旦发生恶性心律失常，则应立即进行紧急处理。对于室性心动过速或心室颤动，立即给予360J体外除颤，直至恢复窦性心律。术前予以缺血预适应、预防性静脉给予利多卡因和补充钾盐可明显减少室性心律失常的发生。对于出现心动过缓的实验猪，静脉给予阿托品1～2mg可提高心率。出现呼吸骤停时及时行心肺复苏。除静脉注射呼吸兴奋剂外，应行辅助人工呼吸包括体外按压或气管插管。有效的辅助呼吸方式为从上腹部向头部方向按压。若出现呼吸抑制。提示预后不良，多难以成功救治。