1.健康小鼠,体重30~50g,雌雄不限。
2.经腹腔注射乌拉坦(1g/kg)全身麻醉、气管切开并插入18G套管连接小动物呼吸机。分离并切开左颈总动脉,插入预充肝素钠的24G静脉留置管,通过压力换能器监测动脉压。同时经四肢皮下针状电极记录标准肢体导联心电图。
3.经食管心脏起搏诱发室颤 4极5F起搏电极经口插入食管约4cm,电极近端与电生理刺激输出端相连。先测定心室起搏阈值(通常起搏电压为15~18V,脉宽5~8毫秒),诱发室颤电压应高于起搏阈值3~5V。采用连续快速起搏诱发室颤,参数设置为:电压20V、脉宽10毫秒、频率20Hz。起搏90秒后暂停,观察1~2秒,如心电图显示起搏诱发出来的室颤自动转复,则立即再起搏30秒,直至诱发出的室颤持续存在、或出现无脉性电活动或出现一条直线(心脏停搏)为止,通常需要持续起搏90~180秒不等。起搏刺激开始后4分钟实施心肺复苏,采用定容型小动物呼吸机行机械通气,通气频率70次/分,潮气量为4ml/kg,人工手法行胸外心脏按压,频率200次/分。按压深度为小鼠胸廓前后径1/3。实验全程连续监护心电和血压。判断诱发心脏骤停的标准为有创血压监测显示平均动脉压<10mmhg伴有正常的动脉搏动波消失,且心电图显示室颤波形、或无脉性电活动、或一条直线;判断自主循环恢复的标准为出现室上性节律(包括窦性,房性或交界性心律)伴有平均动脉压>20mmHg,持续1分钟以上。