动物造模,房颤小型猪模型 z-bio 2023-09-26 875

　　由于心脏的自律性或传导性障碍引起心脏活动频率和节律改变，冲动传导顺序的异常而导致心律失常。人类很多疾病都会引起心律失常，临床上心房颤动较为常见。室性快速性心律失常和心室颤动常常威胁人的生命。所以临床上常常需要复制心律失常的动物模型来进行研究。

　　1.材料和方法

　　(1)动物  随机选用贵阳中医学院实验动物研究所驯化繁殖的第5代实验小型猪，健康无病，体重14.0±1.5kg。

　　(2)仪器  上海产XJJ-Ⅱ型心脏急救监护仪、国产SC-Ⅱ型电动呼吸机、CT-Ⅰ型多功能心脏程序调搏仪、贵州产LFYC-Ⅱ型心律失常治疗仪、特制gF六级导管、针电极、鱼口夹。

　　(3)测定方法  所有贵州小型猪实验前1天晚禁食，实验当天早上用戊巴比妥钠30～40mg/kg作腹腔麻醉。仰位保定作股静脉切开，连通输液瓶保持通畅。输入生理盐水。经口插入气管导管，连接国产SC-Ⅱ型电动呼吸机。分布在四肢及胸部插入针电极，导联线接通电源，连通上海产XJJ-Ⅱ型心脏监护仪。校正标准电压(1mV＝10mm)，走纸速度(25mm/s)。经口置特制gF六级导管入食管，将远端两个电极连接在LFYC-Ⅱ型心律失常治疗仪，以略快于动物自身心率的起搏频率刺激心房，并不断调整导管位置及起搏电压，找到能1：1夺获心房而起搏的*低导管位置和阈值。固定起搏导管，导管近端两个电极用作心电图检测记录。用自行改装的XJJ-Ⅱ型心脏急救监护仪作连续心电图监测、记录，并用以提供复律电击的电能脉冲。实验前均描记每只动物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、aVR、aVL、aVF及V1～6等12个导联图，以供参考(见贵州小型猪正常心电图研究)。

　　①用0.25万～1万单位的乙酰胆碱60滴/min，持续静脉滴注。5min前经食管用800～1000次/ min的矩阵方频脉冲刺激心房，即出现房颤(Af)，观察记录的自动复律时间，然后再次诱发Af，并在短于自动复律时间内经食道电击用直流电同步电击复律，记录能转复Af的电能阈值。

　　②把食道电极导管再推进2cm，以远端1～2个电极组合为阴极，其余4～5个电极组合为阳极，在心电图上T波顶峰前40ms左右经食管电极发放10～20MJ能量作非同步直流电击复制VTA(室性快速性心律失常)。VTA复制成功后，转复室性心动过速(VT)，从0.25MJ能量开始逆档递增作同步电击；转复室扑(VF)、室颤(Vf)则依次从5MJ能量递增作非同步电击，记录刚能复律的阈值。

　　转复VTA时，需用复苏药物和呼吸机通气作心脏按压抢救措施。需作心脏起搏时，心房起搏用食道双电击，心室起搏时用食道与经皮心脏穿刺针电极对。复律成功，窦性心律恢复15min后，再反复诱发VTA，依上步骤重复。

　　2.结果

　　(1)实验性心律失常动物模型复制  常用乙酰胆碱、乌头碱、肾上腺素等药物诱导法、电刺激法和结扎冠状动脉等方法来引起心律失常。我们在实验过程中体会到：药物浓度、剂量等注入动物体内速度等都不易准确掌握。诱导药物量少，浓度低，注入速度慢时不能引起心律失常，或出现时间短，达不到观察治疗转复的目的；反之，则很快出现呼吸抑制，心脏骤停等引起动物死亡。其他方法多需开胸，动物易死亡，而且又不能在一个动物体上反复重复使用，对动物、药物以及时间、精力造成浪费。

　　本文的方法无创伤，成功率高，重复次数多。本实验用8只实验小型猪，共诱发房颤(Af)49次，成功48次(占97.96％)，自行转复持续时间8.80±1.82min；诱发抢救中出现室性快速心律失常(VTA)32次；抢救中出现室性心动过速(VT)8次；诱发或出现室扑(VF)、室颤(Vf)24次。

　　(2)复制心律失常模型后的小型猪均作活体观察  经食管电刺激后外观无不良反应。饮水、采食正常，无吞咽困难、呃逆情况，大小便正常，体温呼吸正常，行动自如活跃。其中3号猪反复复制Af、 VF、Vf，用电击复律后又开胸敷贴药物诱发心律失常，*后作冠状动脉结扎制作心肌梗死模型，术后仍存活6d(因实验需要才处死取标本)。

　　(3)食管病理切片光学显微镜观察  实验后的8只实验小型猪，分别在3～25d后处死取gF电极放电处段的食道标本，作连续病理切片检查，均未发现有组织学损伤情况。

　　3.讨论与结论  贵阳中医学院实验动物研究所培育、驯化的实验小型猪，具有遗传背景清楚，性早熟(4月龄左右)、体重合适(作实验时14kg左右)、性情驯良温和、易被实验者掌握使用。其耐受强、重复性好，实验结果稳定可靠，且容易饲养，繁殖性能好，容易获得，确为一种很好的实验动物。因食性和人类相同，故消化系统、心血管系统和人相似，尤其冠状动脉分布特点比其他动物更接近于人，选用它复制心血管疾病动物模型比其他动物都好。

　　用贵州小型猪和本文方法复制心律失常模型简单易行，复制率高，无创伤。实验后的动物可存活继续观察反复使用，节约了大量动物、时间、药物、人力，给临床治疗心血管疾病和新药研究提供了一种可靠的心律失常小型猪模型。