目的:建立评价芍药苷对大鼠背根神经节神经元细胞内游离Ca2 +浓度影响的方法。
方法:通过显微解剖获得大鼠背根神经节,获得大鼠背根神经节(DRG),消化并通过胰蛋白酶筛选,用DF-12和抗有丝分裂培养基替代培养和纯化使用细胞免疫荧光技术获取神经元并确定DRG神经元的纯度;使用激光共聚焦显微镜成像技术观察细胞的Ca2 +荧光强度和Ca2 +的变化分析荧光强度的变化率,以研究pa药苷对DRG细胞中游离钙离子浓度和辣椒素受体的影响。
结果:通过上述方法分离的DRG细胞的纯度,通过阻断辣椒素激活的瞬时受体电位通道的作用而增加了细胞内Ca 2+,辣椒素超过95%。可以压制。 eon药苷具有与辣椒素相似的作用,并且可以阻止细胞外Ca2 +流入。
结论:Pa药苷可能通过作用于TRPV1通道而抑制DRG细胞中Ca2 +的显着增加。该方法可用于评估药物对大鼠DRG细胞中Ca2 +浓度的影响。