动物造模,T细胞缺陷 z-bio 2023-09-12 593

　　1. CD4基因敲除小鼠  CD4(CD4 antigen)基因敲除小鼠的纯合子不能在细胞表面表达CD4。CD8+T细胞及髓样成分发育正常。这说明在祖先细胞及CD4+ CD8+胸腺细胞的表达不是必须的。突变小鼠的细胞毒T细胞抗病毒的活性正常，辅助T细胞抗病毒的活性明显降低。因此，在免疫失调中，突变小鼠对研究CD4+辅助T细胞的功能非常有用。

　　2. CD8基因缺陷小鼠  CD8基因缺陷小鼠的T细胞表面没有CD8的表达，纯合子小鼠没有功能性的细胞毒T细胞，有正常的CD4+T淋巴细胞群。尽管小鼠的抗同种抗原及病毒抗原的细胞毒T细胞反应明显降低，但抗同种抗原的增殖反应及其对体内表现的B淋巴细胞的辅助表现正常。这表明CD8细胞对于Ⅰ型MHC限制的细胞毒T细胞的成熟及阳性选择是必须的，但对中间淋巴细胞群(CD8+ CD4- TcR-或CD4+ CD8+ TcR低)发育成功能型Ⅱ类 MHC限制的辅助T细胞不是必需的。

　　3. CD14基因敲除小鼠  CD14基因敲除小鼠，该小鼠纯合子能存活和生育。小鼠的巨噬细胞不能产生参与LPS反应的细胞因子。这种无应答性与NF-kB和c-Jun N端丝裂原激活蛋白酶(MAPK)通路的活性损伤有关，是分析巨噬细胞与细菌感染机制的模型。

　　4.Fc受体的γ亚单位基因敲除小鼠  Fc受体的γ亚单位基因敲除小鼠的纯合子能存活和生育但缺乏免疫球蛋白Fc受体的γ亚单位(Fcer1g)。Fcer1g是IgG高亲和力受体的重要组成部分并与IgG高亲和力受体和T细胞受体-CD3复合物有关。当缺乏免疫球蛋白Fc段受体γ亚基时，CD3复合物等就变得无法组装。尽管Fcer1g纯合子产生正常的T细胞，但它们不能吞噬抗体包裹颗粒，并缺乏NK细胞介导的抗体依赖的细胞毒性及肥大细胞介导的过敏反应，削弱对免疫复合物的炎症反应。这种小鼠能用来评估Fc受体在体液和细胞免疫中的功能。

　　5.穿孔素基因敲除小鼠  穿孔素(perforin)是一种由NK、CTL、LAK等杀伤细胞胞质颗粒释放的杀伤靶细胞的介质，在抗肿瘤、抗病毒及寄生虫治疗中有着重要的意义。在淋巴细胞介导的细胞毒作用中，穿孔素以及其他介质从胞内释放出来后，作用于靶细胞，它主要是以单聚体形式结合并插入膜内，而后逐渐形成一中空的多聚体，即在膜上形成一5～20nm大小的孔，可以令水分子、离子以及其他的小分子通过，进入靶细胞内，导致细胞*终死亡。C57BL/6-Prf1 tmlSdz /J是穿孔素基因敲除小鼠。该小鼠能存活和生育，具有正常数量的CD8+T细胞和NK细胞，但这些细胞不能在体外溶解病毒感染的细胞和纤维肉瘤细胞。这些小鼠也不能清除淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒，它们能无效率地消除纤维肉瘤细胞。

　　6.T细胞受体缺陷的小鼠

　　(1)T-细胞受体β链基因敲除小鼠：T-细胞受体β链基因(T-cell receptor beta-chain gene, Tcrb)敲除小鼠。纯合子小鼠能存活和生育。小鼠的胸腺细胞的数量为野生型小鼠的8％左右，而CD4+ CD8+双阳性细胞数量则是野生型的6％。但是双阴性CD4- CD8- (IL-2受体阳性)细胞的比例增加到全部细胞数量的50％。突变小鼠αβ胸腺细胞的分化受阻的比 Tcra品系早；γζT细胞分化正常。当4～6个月龄时，这些突变小鼠可能发生炎症性肠疾病。

　　(2)T-细胞受体δ链基因敲除小鼠：T-细胞受体δ链基因(T-cell receptor delta-chain gene, Tcrd)敲除小鼠。纯合子小鼠能存活和生育。在所有成熟淋巴样和上皮器官中，γδT细胞受体表达缺陷。aβT细胞系发育正常。CD4+ CD8-和CD4- CD8+ αβT细胞类型明显正常。

　　(3)T-细胞受体β链和T-细胞受体δ链双敲除小鼠：T-细胞受体β链和T细胞受体δ链 Tcrb Tcrd(T-cell receptor beta chain; T-cell receptor delta chain)双敲除小鼠纯合子既不表达αβT细胞受体也不表达γδT细胞受体。在一定的饲养条件下，纯合子发生中度的炎症性肠炎。

　　用B6.129P2-Tcrb tm1Mom Tcrd tm1Mom小鼠的实验表明清除轮状病毒感染主要为B细胞介导及T细胞非依赖的。用鼠轮状病毒同类株(EC野生型)感染B6.129P2-Tcrb tmlMom Tcrd tm1Mom /J，CD-1小鼠及C57BL/6J小鼠，全部实验小鼠小肠内侧黏膜淋巴组织和肠系膜淋巴结的增大没有差别，包括活性B细胞的数量的增加相同，但T细胞则相反。感染3～4d后，感染小鼠的组织中含有轮状病毒特异的IgM抗体但没有IgA抗体。

　　B6.129P2-Tcrd tm1 Mom/J小鼠则是αβT细胞正常，γζT细胞受体无法在T细胞表面表达的品系。该品系小鼠无法发生为炎症性肠病。B6-129P2-Tcrbtm1Mom Tcrdtm1Mom/J小鼠则是αβT细胞受体和γζT细胞受体都无法正常表达的小鼠品系。该小鼠在正常的室内饲养环境条件下可以发生轻度的炎症性肠道疾病。