动物实验,雷帕霉素 中国实验动物信息网 2020-08-22 648

　　目的：以雷帕霉素为靶标抑制mTOR，研究其对大鼠心脏瓣膜基质细胞增殖的影响。

　　方法：在体外分离，培养和鉴定大鼠瓣膜基质细胞；将细胞随机分为两组：雷帕霉素组和对照组；使用MTT方法治疗前后。我们检测并绘制了大鼠瓣膜基质细胞的生长曲线。流式细胞仪检测雷帕霉素对细胞周期的影响；T-PCR检测细胞内S6和P70S6K mRNA表达水平。 Western印迹用于检测细胞内S6、P70S6K，P-S6和P-P70S6K蛋白表达水平。

　　结果：我们成功地分离和培养了体外分离的大鼠瓣膜间质细胞；对照组的细胞活性明显高于加药组（P\u003c0.05），增殖缓慢。流式细胞仪检测结果显示，加药组与对照组的每个周期细胞百分比无显着差异；加药组中S6和P70S6K蛋白的磷酸化水平降低（P\u003c0）。 .05）。

　　结论：雷帕霉素可能抑制瓣膜基质细胞的增殖。原因可能是由于mTOR的抑制和其靶蛋白S6和P70S6K磷酸化水平的下调而不是细胞周期的变化。