动物造模,肺纤维化 中国实验动物信息网 2022-12-20 561

　　目的 探讨槲皮素对肺纤维化大鼠肺组织细胞间质转化、炎症及对 NOX4-P62 信号途径的影响,为 进一步阐明槲皮素对肺纤维化的作用机制提供实验依据。

　　方法 将实验大鼠分为对照组、博来霉素组(BLM 组) 和博来霉素+槲皮素组(BLM+QUE 组),分别于造模后第 7、14、28 天观察各组肺组织外观,利用苏木素-伊红染色 法(HE 染色)评价肺纤维化情况,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测各组肺组织还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 磷酸氧化酶 4(NOX4)、自噬蛋白 P62、核因子 κB(NF-κB)的蛋白表达情况,反转录-聚合酶链反应( qRT-PCR)检测 人肺腺癌细胞株 A549 细胞血管平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和钙粘附蛋白 E(E-cadherin)的 mRNA 表达水平,酶联免 疫吸附法(ELISA 法)检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。 结 果 BLM 组随时间增加大鼠肺纤维化呈进行性加重,BLM+QUE 组在第 7 天时症状较 BLM 组轻,在第 28 天时症状 明显减轻。 BLM 组的 TGF-β1、IL-1β、TNF-α、NOX4、P62、NF-κB 蛋白表达,较对照组明显上升,差异具有统计学意 义(P<0. 7="" que="" blm="" p="">0. 05),但在第 14、28 天时较 BLM 组明显下 降,差异显著(P<0. 05)。 与对照组比较,加入 TGF-β1 的 A549 细胞 E-cadherin、α-SMA mRNA 的表达分别明显降低 和升高(P<0. 05);给予槲皮素后,E-cadherin、α-SMA mRNA 的表达较 TGF-β1 组分别明显升高和降低(P<0. 05)。

　　结论 槲皮素能够抑制 TGF-β1 对人肺腺癌细胞株 A549 细胞诱导的间质转化的转变,减轻肺纤维化大鼠的炎症反 应,缓解博来霉素所致的大鼠肺纤维化,自噬活性在博来霉素诱导大鼠发生肺纤维化的过程中受到抑制;槲皮素可 能通过抑制 NOX4-P62 信号途径,激活自噬,减轻大鼠肺纤维化。