动物造模 中国实验动物信息网 2022-12-19 660

　　目的 探究褪黑素调控 NF-κB 信号通路调节胃癌小鼠 Th1 / Th2 免疫平衡的机制。

　　方法 将 50 μg (约含有细胞 1×106 个)胃癌细胞一次性注射到小鼠左侧前肢皮下,在建模 7 d 后触摸到瘤体生成提示胃癌移植瘤 小鼠模型建模成功。 10 只健康小鼠作为对照组,建模成功的小鼠分为模型组、模型+褪黑素组,每组 10 只。 模型+ 褪黑素组皮下多点注射褪黑素(10 mg / kg,每天 1 次,21 d),其余组注射等量的生理盐水。 采用游标卡尺、天平测量 各组肿瘤体积、重量。 通过免疫组化检测肿瘤组织中 Ki67 和 Bcl2 评估胃癌细胞增殖和凋亡。 通过 ELISA 检测外 周血 IFN-γ 和 IL-4 的水平。 通过流式细胞术检测外周血 Th1 和 Th2 细胞比例。 通过 qPCR 和 Western blot 检测肿 瘤组织和淋巴细胞中 NF-κB mRNA 和蛋白水平。

　　结果 与对照组相比,模型组、模型+褪黑素组的肿瘤体积、质量、 Ki67 和 Bcl2 染色强度、IL-4 水平、Th2 细胞比例、NF-κB mRNA 和蛋白表达均显著升高(P<0. 05),IFN-γ 水平、Th1 比例、Th1 / Th2 比值显著降低(P<0. 05);与模型组相比,模型+褪黑素组的肿瘤体积、质量、Ki67 和 Bcl2 染色强度、 IL-4 水平、Th2 细胞比例、NF-κB mRNA 和蛋白表达均显著降低(P<0. 05),IFN-γ 水平、Th1 比例、Th1 / Th2 比值显著 升高(P < 0. 05)。 结 论 褪 黑 素 可 能 通 过 调 控 NF-κB 通 路 抑 制 胃 癌 移 植 瘤 小 鼠 模 型 的 肿 瘤 生 长, 并 调 节 Th1 / Th2 平衡。