动物造模 中国实验动物信息网 2024-02-19 1055

　　目的 探讨雄激素对睾丸切除(GDX)老年大鼠胃粘膜线粒体功能的影响及机制。

　　方法 36 只 SD 雄性大鼠随机分为 3 组:假手术组(Sham,n = 12)、模型组(GDX,n = 12)和补充雄激素的模型大鼠( n = 12)。 造模大鼠行 GDX,造模后雄激素组灌胃睾丸酮(13. 6 mg / (kg·d),溶于芝麻油中)。 假手术组和模型组大鼠使用芝麻油进行相同的治疗。 治疗结束后收集胃组织标本,分别采用试剂盒检测胃粘膜线粒体中 Mn-SOD、GSH-Px、GSH、 GSSG、GSH/ GSSG 和 ROS 水平,罗丹明 123 荧光法检测线粒体膜电位,流式细胞仪检测细胞凋亡。 体外试验以人永生胃粘膜细胞 GES-1 为研究对象,应用 H2O2 诱导细胞损伤,考察雄激素和 ALDH2 抑制剂 Disulfiram 对细胞活力和凋亡影响。

　　结果 与 Sham 组相比,GDX 组 ROS、GSSG 水平、胃粘膜细胞凋亡和裂解的 Caspase-3、细胞质 Cyt c 蛋白表达显著增加(P<0. 05),而 Mn-SOD、GSH-Px、GSH、GSH/ GSSG 水平、线粒体膜电位、ATP 水平和线粒体 Cyt c 蛋白、ALDH2 蛋白表达显著降低(P<0. 05)。 在雄激素治疗后,GDX 老年大鼠上述变化显著逆转(P<0. 05)。 体外实验中,雄激素处理显著逆转了H2O2 对GES-1细胞的损伤作用(P<0. 05);然而,当联合加入Disulfiram时,雄激素的治疗活性明显降低(P<0. 05)。

　　结论 雄激素缺乏导致老年大鼠胃粘膜细胞线粒体功能障碍和线粒体ROS积累增加,诱导胃黏膜细胞凋亡,这种损害作用至少部分与ALDH2的抗氧化功能抑制有关。