目的 探讨膜细胞对化疗损伤性颗粒细胞的影响以及左归丸含药血清的干预作用。
方法 制备左归丸含药血清,培养大鼠卵巢颗粒细胞和膜细胞,分8组,分别是(1)空白对照组;(2)共培养组;(3)ZGW血清组; (4)ZGW血清+共培养组;(5)模型组;(6)模型+共培养组;(7)模型+ZGW血清组;(8)模型+ZGW血清+共培养组。 实时荧光定量PCR 法(qRT-PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测Bax、Caspase-3、Beclin-1、p62、LC3B在转录水平和翻译水平上的表达。
结果 模型组的Beclin-1、LC3B、Bax 及 Caspase-3基因在转录水平及翻译水平上均有高表达,加入10%左归丸含药血清处理或与膜细胞共培养可下调上述基因的表达;p62基因的表达较对照组降低,加入10%左归丸含药血清处理或与膜细胞共培养可上调模型组p62基因表达。 当实验组与膜细胞共培养时加入10%左归丸含药血清后,5种基因表达的变化程度更明显。
结论 膜细胞能缓解体外颗粒细胞的化疗性损伤,且与左归丸含药血清有协同作用,与抑制颗粒细胞自噬和减少其凋亡有关。