动物造模 中国实验动物信息网 2022-10-19 370

　　目的 通过微创的方式，利用机械损伤联合脂多糖灌注法构建符合临床损伤特征的宫腔黏连动物模型，为深入研究IUA的发病机制、病理变化及探索临床治疗方案提供支持。

　　方法 取雌性ICR小鼠20只随机分为2组（n=10），间苯三酚松弛宫颈后，造模组动物经宫颈给予宫腔内机械损伤+脂多糖（LPS）灌注（0.5mg/kg），假手术组动物仅接受等体积生理盐水灌注。分别于术后7、14、21 d收集子宫标本，常规HE和Masson染色，检测子宫内膜形态及纤维化情况；免疫荧光检测子宫内膜中巨噬细胞（F4/80）分布，qPCR 及Westem Blot检测造模14d小鼠子宫内膜中炎症因子（II-1β、TNF-α、IL-4、IL-10和IL-6）及子宫内膜容受性相关标志物（Integrin B3和LIF）的表达变化。随后，取20只小鼠随机分为经宫颈机械损伤+脂多糖灌注组（n=10）为造模组和假手术组（n=10），造模2周后合笼，记录妊娠母鼠数量；妊娠约18d处死母鼠，记录胚胎数量。

　　结果 机械损伤+脂多糖灌注后小鼠子宫中炎症反应和纤维化程度显著增加。其中模型组小鼠子宫内膜厚度较假手术组显著降低，子宫内膜细胞坏死明显，腺体缺失，腔上皮和腺上皮细胞结构不完整，组织纤维化严重。随后，检测发现巨噬细胞标志物F4/80在模型组小鼠子宫内膜中表达显著上升（P<0.05），并且模型组小鼠子宫内膜中促炎因子Ⅱ-1β、TNF-α、和L-6表达显著升高（P<0.05），而抑炎因子IL-4、IL-10表达明显下降（P<0.05）。进一步研究发现子宫内膜容受性标志物 LF和Integrin β3表达量显著下降（P<0.05），且生育实验结果发现妊娠母鼠及胎鼠数量均显著下降（P<0.05）。

　　结论 本研究通过微创的方式经宫颈机械损伤+脂多糖灌注，成功建立小鼠IUA模型构建方法，符合临床IUA损伤特征，可为后续针对IUA发病机制及治疗方法研究提供稳定的动物模型。