动物造模,心肌缺血再灌注损伤 中国实验动物信息网 2023-07-21 882

　　目的 基于网络药理学信息筛选方法，探究白藜芦醇抗大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用，以及其在大鼠体内的作用机制。

　　方法 利用 TCMSP数据库筛选RSV作用基因靶点，并利用 GeneCards数据库筛选 MI/R 损伤相关靶基因。运用 R语言软件对RSV和MI/R相关靶基因取交集，筛选得到RSV治疗 MI/R损伤可能的靶基因，并通过Cytoscape 软件绘制基因网络，筛选出核心靶基因;*后运用 R语言软件对这些靶基因进行 GO及KEGG通路分析。将 30 只SD 大鼠随机分为假手术组（Sham）、缺血再灌注组（MI/R）和白藜芦醇给药组（RSV）。通过结扎左冠状动脉前降支诱导 MI/R损伤大鼠模型，然后测定大鼠血浆中乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）、肌酸激酶（creatine kinase，CK）、心肌肌钙蛋白I（cardiac troponin Ⅰ，cTn I）含量以及心肌梗死面积。HE染色观察心肌结构，TUNEL 染色检测心肌细胞凋亡，免疫组织化学和蛋白质印迹法检测心肌组织中凋亡相关蛋白 caspase-3、Bcl-2和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand，TRAIL）表达。

　　结果 网络药理学信息筛选发现 RSV 治疗MI/R损伤的核心靶基因有 86 个，主要涉及细胞因子受体、磷酸酶结合和死亡受体等生物学过程，以及参与调控糖尿病并发症的AGE-RAGE信号通路和细胞凋亡信号通路。大鼠体内实验结果显示，相比于 Sham 组，MI/R组心肌组织中TRAlIL 蛋白表达水平明显升高（P<0.01），血浆LDH、CK及cTn Ⅰ含量明显增加（均P<0.01），心肌梗死面积增大，同时心肌组织中肌纤维排列紊乱，细胞凋亡率和caspase-3蛋白表达水平明显升高（P<005），Bd-2表达明显下调（P<0.05 ）;而RSV组心肌纤维排列相对规则，LDH、CK、cTn I含量及TRAIL蛋白表达量减少，心肌梗死面积减少，细胞凋亡率降低（均P< 0.05）。

　　结论 RSV可能通过调节TRAlIL 蛋白表达抑制细胞凋亡，从而逆转MI/R损伤。