动物造模,暴发性肝衰竭,药效评价 中国实验动物信息网 2024-05-14 800

　　目的 探究前列地尔(PGE1)对暴发性肝衰竭(FHF)大鼠对肝功能的影响,并探讨其对真核翻译起始因子 2α(eIF2α) / 激活转录因子 4(ATF4) / C/ EBP 同源蛋白(CHOP)通路的调控作用。

　　方法 SPF 级 SD 雄性大 鼠 90 只按随机数表法分为对照组、模型组、阳性对照组、低、中、高剂量 PGE1 组,除对照组外,其它组大鼠均采用腹腔注射 D-氨基半乳糖(D-GalN)-大肠杆菌内毒素脂多糖(LPS)的方法建立 FHF 大鼠模型,对照组腹腔注射等量的生理盐水。 造模 6 h 后,阳性对照组及低、中、高剂量 PGE1 组分别尾静脉注射促肝细胞生长素 1. 36 mg / kg,PGE1 12. 5、25、37. 5 μg / kg,每天 1 次,连续给药 3 d,对照组和模型组尾静脉注射等量的生理盐水。 在造模 72 h 后处死大鼠,腹主动脉采血,检测血清丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)水平;解剖取肝组织用苏木精-伊红(HE)染色法观察各组大鼠肝组织病理学变化;采用实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)法检测肝组织中 eIF2α/ ATF4 / CHOP / 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA 和蛋白、磷酸化-eIF2α(p-eIF2α)蛋白水平。

　　结果 与对照组相比,模型组肝细胞广泛变性并有局灶性坏死,中央静脉受损,血清 ALT、AST、TBIL,肝组织中 eIF2α、ATF4、CHOP、Caspase-3 mRNA 及 p-eIF2α/ eIF2α、ATF4、CHOP、Caspase- 3 蛋白水平均升高(P<0. 05);与模型组相比,阳性对照组、低、中、高剂量 PGE1 组肝细胞损害有所降低,坏死细胞数量减少,血清 ALT、AST、TBIL 水平,肝组织中 eIF2α、ATF4、CHOP、Caspase-3 mRNA 及 p-eIF2α/ eIF2α、ATF4、 CHOP、Caspase-3 蛋白水平降低(P<0. 05);且随着 PGE1给药剂量的增加,低、中、高剂量 PGE1 组血清 ALT、AST、 TBIL 水平,肝组织中 eIF2α、ATF4、CHOP、Caspase-3 mRNA 及 p-eIF2α/ eIF2α、ATF4、CHOP、Caspase-3 蛋白水平依次降低(P<0. 05),呈剂量依赖性;与阳性对照组相比,低、中剂量 PGE1 组血清 ALT、AST、TBIL 水平,肝组织中 eIF2α、 ATF4、CHOP、Caspase-3 mRNA 及 p-eIF2α/ eIF2α、ATF4、CHOP、Caspase-3 蛋白水平均升高(P<0. pge1="" tbil="" caspase-3="" mrna="" p="">0. 05)。

　　结论 PGE1 可能通过抑制 eIF2α/ ATF4 / CHOP 通路表达,减轻大鼠肝细胞凋亡,达到保护肝的作用,可能作为FHF潜在的治疗药物。