目的 研究人胃癌转移裸鼠模型中人Alu基因的表达水平与组织脏器中胃癌转移程度的相关性, 探索建立胃癌转移模型早期评估的分子生物学方法。
方法 分别以人胃癌细胞 SGC-7901、MKN45 和正常胃黏膜细胞 GES1 基因组 DNA 为模板构建标准质粒,通过实时荧光定量 PCR 检测不同比例胃癌细胞 SGC-7901 中 Alu 基因的表达,获取相关性曲线;选取胃癌细胞 SGC-7901 和 MKN45,通过裸鼠皮下接种的方式构建人胃癌细胞异种移植转移模型,实时荧光定量 PCR 方法检测模型鼠肝、脾、肺、肾和皮下肿瘤组织中的人 Alu 基因表达,获得 Alu 基因的表达与各器官组织中肿瘤转移程度的相关性曲线;将临床胃癌患者新鲜肿瘤标本皮下接种裸鼠构建异种移植模型,进一步验证模型鼠各组织中人 Alu 基因的表达与器官中肿瘤转移程度的相关性。
结果 胃癌细胞 SGC-7901 的含量与其 Alu 基因的 Ct 值呈负相关(R2 = 0. 9239);人胃癌细胞异种移植(CDX)裸鼠转移模型中,人 Alu 基因的 表达在皮下肿瘤中处于较高水平,在肺转移瘤和肝转移瘤中的表达则介于正常裸鼠与皮下肿瘤之间,与组织病理学检查结果相符;胃癌病人肿瘤异种移植(PDX)模型中,已确定发生转移的脏器中虽未形成肉眼可见的转移灶,但其人 Alu 基因的表达(Ct 值 17. 86)与正常裸鼠(Ct 值 22. 18)差异显著(P < 0. 05);而对于肉眼可见的转移灶,其人 Alu 基因的表达(Ct 值 14. 29)则差异极显著(P < 0. 01)。
结论 人胃癌裸鼠转移模型中,人 Alu 基因的表达与胃癌转移程度呈正相关,Alu 基因表达越高,则该组织中转移的肿瘤细胞就越多,形成的转移灶越明显。