动物造模,基因敲除 中国实验动物信息网 2022-09-05 345

　　目的 建立肝特异性 LCMT1 基因敲除小鼠模型。

　　方法 运用 CRISPR/ Cas9 技术构建肝特异性 LCMT1-KO 小鼠。 通过 RT-PCR、实时定量 PCR、Western Blot 和 HE 染色等方法鉴定及比较野生和敲除小鼠的差 异;观察和分析两组小鼠的一般情况、繁殖能力和子代存活率。

　　结果 成功鉴定子代的基因型;LCMT1-KO小鼠肝LCMT1 mRNA和蛋白质水平显著低于对照组小鼠;两组小鼠的饮食、饮水、体重、繁殖能力、子代存活率、肝外观和 HE染色无明显差异;LCMT1-KO小鼠心脏、大脑和肾组织中LCMT1表达与对照组相比没有显著变化;LCMT1-KO小鼠sgRNA未发生脱靶。

　　结论 成功构建肝特异性LCMT1基因敲除小鼠,为研究LCMT1基因在疾病中的调控作用提供实验手段。