动物造模 中国实验动物信息网 2022-08-04 633

　　目的 构建并评估胰腺癌免疫系统人源化小鼠模型,以期为胰腺癌的免疫治疗研究提供理想的临床前模型。

　　方法 应用Ficoll密度梯度离心法,从健康人外周血中分离出新鲜的单个核细胞( peripheral blood mononucear cells,PBMC),经尾静脉注射植入重度联合免疫缺陷小鼠NCG体内,以构建免疫系统人源化小鼠模型, 随后在小鼠皮下植入人胰腺癌细胞系Aspc1,并定期监测肿瘤生长情况,在PBMC植入后第3周,应用断尾法采集小鼠外周血进行流式分析,检测人CD45+细胞的水平,当肿瘤生长至100~200mm3时开始给予抗PD-1单抗治疗, 持续治疗3周后,对小鼠施行安乐死并取材,应用流式细胞术、免疫组化等方法分析胰腺癌免疫系统人源化小鼠外周血、脾、骨髓及肿瘤组织中人免疫细胞的浸润及活化情况。

　　结果 植入人PBMC3周后,在小鼠外周血、脾及骨髓中可检测到较高水平的人 CD45+细胞;重建的人源免疫系统能够显著抑制人胰腺癌肿瘤的生长(P < 0. 01,P<0.001),并被人抗PD-1单抗活化,促进肿瘤组织中细胞毒性CD8+T细胞浸润和 PD-L1表达。

　　结论 成功构建胰腺癌免疫系统人源化小鼠模型,其免疫系统能够对人抗PD-1单抗作出反应,抑制肿瘤生长,可作为一种理想的临床前动物模型用于胰腺癌免疫治疗研究。