动物造模 中国实验动物信息网 2022-07-21 457

　　目的： 探讨尼古丁抑制碘乙酸钠(MIA)诱导的骨关节炎软骨细胞凋亡。

　　方法： 酶消化法分离大鼠原代软骨细胞,并用10-8,10-7,10-6,10-5 mol/L尼古丁处理细胞48 h,随后实验分为5组,除正常组外,其余4组皆用4 μM MIA处理24 h,并给予尼古丁。MTT法检测各组软骨细胞活力;Annexin V-FITC/PI流式双染细胞术检测各组软骨细胞凋亡;分光光度法检测各组软骨细胞中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase 3)活性;Western blot分析磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)激活状况及下游靶分子Bax,Bcl-2的表达情况。

　　结果： 10-7,10-6 mol/L尼古丁显著促进大鼠软骨细胞活力(P < 0.05),10-5 mol/L尼古丁显著降低大鼠软骨细胞活力(P < 0.05),10-8 mol/L尼古丁对大鼠软骨细胞活力无影响(P > 0.05)。10-8,10-7,10-6 mol/L尼古丁能剂量依赖性的提高MIA诱导的大鼠软骨细胞活力,并抑制MIA诱导的大鼠软骨细胞凋亡及Caspase 3活性(P < 0.05);10-7,10-6 mol/L尼古丁能提高PI3K表达及AKT磷酸化水平,并下调促Bax表达,上调Bcl-2表达(P < 0.05)。

　　结论： 一定剂量尼古丁能显著的抑制MIA诱导的大鼠软骨细胞凋亡,可能与PI3K/AKT信号通路有关。