动物造模,肠缺血再灌注损伤 中国实验动物信息网 2022-07-20 363

　　目的：探讨谷氨酰胺联合脐血间充质干细胞（MSCs）移植在大鼠肠缺血再灌注损伤中作用。

　　方法：体外复苏并培养脐血间充质干细胞移植前备用，观察CM-DiI荧光标记后脐血间充质干细胞的去向。80只SD大鼠随机分为正常对照组，缺血再灌注损伤组，谷氨酰胺组，MSCs移植组及联合组每组各15只。对照组采用生理盐水灌肠，损伤组采用TNB（S乙醇稀释）灌肠，在TNBS建模后1 h，谷氨酰胺组于尾静脉输入谷氨酰胺0.45 g/kg、MSCs移植组于尾静脉输入1×1010/L脐血间充质干细胞悬液，联合组尾静脉输入谷氨酰胺0.45 g/kg+脐血间充质干细胞悬液1×1010/L。通过ELISA法检测各组大鼠血清中肠脂肪酸结合蛋白（IFABP）、白介素-6（IL-6）、超氧化物歧化酶（SOD）的含量；各组于再灌注1 h、3 h后检测肠组织含水率；通过RT-PCR、Western blot观察大鼠肠黏膜上皮细胞caspase-3、NF-kB、Bcl-2在谷氨酰胺联合MSCs移植后的mRNA和蛋白的表达情况。

　　结果：通过荧光示踪法观察到移植的MSCs细胞分布于肠粘膜淋巴组织内和腺上皮细胞间，表明MSCs可能参与了肠缺血再灌注损伤的修复过程。各组大鼠血清中SOD、IFABP、IL-6的含量变化比较，损伤组血清中IFABP、IL-6的含量较对照组显著增加，而谷氨酰胺组，MSCs移植组及联合组与之比较，则显著减少，联合组减少更为明显，损伤组血清中SOD的含量较对照组显著减少，而谷氨酰胺组，MSCs移植组及联合组与之比较，则显著增高，联合组增高更为明显（P<0.05）。再灌注1 3="" p="">0.05）。与对照组比较，损伤组肠黏膜上皮细胞caspase-3、NF-kB的mRNA和蛋白表达明显上调，Bcl-2的mRNA和蛋白表达明显下调（P<0.05），而谷氨酰胺组、MSCs移植组及联合组与之比较，caspase-3、NF-kB的mRNA和蛋白表达明显下调，Bcl-2的mRNA和蛋白表达明显上调（P<0.05），谷氨酰胺组及mscs移植组之间无统计学差异（p>0.05），但两组与联合组比较，差异明显（P<0.05）。

　　结论：谷氨酰胺组及MSCs移植后，明显减轻了大鼠肠缺血再灌注损伤程度，其可能通过抑制caspase-3、NF-kB表达和促进Bcl-2表达减轻肠黏膜缺血再灌注损伤。