动物造模 中国实验动物信息网 2022-07-20 372

　　目的：观察成纤维细胞生长因子-2/聚乳酸-聚乙二醇-聚乳酸/骨形态发生蛋白-2（FGF-2/PELA/BMP-2）微囊支架对SD大 鼠骨膜来源干细胞成骨分化作用。

　　方法：提取SD大鼠骨膜来源干细胞（PDSC），进行流式细胞学表面标记物鉴定及成骨、成软 骨、成脂三系诱导并进行茜素红、甲苯胺蓝、阿利新蓝、油红O染色及免疫荧光实验。制备FGF-2/PELA/BMP-2、FGF-2/PELA、 PELA/BMP-2、PELA四组材料，进行扫描电镜（SEM）观察微囊表面，通过ELISA实验制作两因子的控释曲线。将4组材料浸提 液与第3代骨膜来源干细胞进行共培养，分别在7、14 d进行碱性磷酸酶（AKP）活性检测，分别在7、14、21 d进行qRT-PCR成骨 基因表达检测，观察比较各组PDSC成骨分化能力，数据汇总后进行统计学分析。

　　结果：流式细胞学表面标记物鉴定显示PDSC 表达间充质干细胞表面标记物，三系诱导分化染色结果表面PDSC具有成骨、成软骨、成脂等多向分化能力。AKP活性结果显 示，FGF-2/PELA/BMP-2组在PDSC培养的7 d及14 d，AKP活性*高，差异显著。FGF-2/PELA/BMP-2组的qRT-PCR结果提示 RunX-2、OCN表达量均高于其他组，且在第14天RunX-2表达量达到顶峰，OCN呈持续增长趋势。

　　结论：FGF-2/PELA/BMP-2 仿生控释微囊支架中的细胞因子活性得以保留，并相对其他实验组具有更高的促进PDSC成骨分化的能力。