动物造模,脓毒症,急性肺损伤 中国实验动物信息网 2022-07-06 1487

　　目的    探究下调miR-128-3p缓解脓毒症大鼠急性肺损伤的炎症反应和肺组织形态学的影响。

　　方法    选取60只健康3周龄SD大鼠,采用随机分组法将大鼠分为:假手术组、脓毒症模型组、空白转染组和miR-128-3p沉默组,每组15只。 除假手术组外各组大鼠采用盲肠结扎穿孔法制备大鼠脓毒症模型;空白转染组构建空白质粒并 转染大鼠;miR-128-3p沉默组构建慢病毒质粒并转染大鼠。 RT-PCR 检测 miR-128-3p 表达,确定干扰成功;检测各 组大鼠静息通气量、气道阻力改变和肺容积变换情况;采用ELISA检测外周血清IL-6、TNF-α、iNOS的含量;采用HE染色观察肺上皮组织纤维化情况及病理损伤情况;采用TUNEL染色结合蛋白质印记检测肺组织中 Caspase-3和 Caspase-9的表达;采用MASSON染色结合蛋白质印记检测 TGF-β 和 α-SMA 的表达情况。

　　结果    HE染色结果显示:miR-128-3p 沉默组细胞分布较为均匀,且坏死细胞较少。 MASSON 染色果显示:脓毒症模型组肺组织出现严重纤维化和损伤,miR-128-3p 沉默组肺组织纤维化程度得到改善。 相比假手术组,脓毒症模型组大鼠 miR-128-3p表达、气道阻力、IL-6含量水平、iNOS含量水平、TNF-α含量水平、肺组织细胞凋亡率、 cleaved cas3/Caspase-3、 cleaved cas9/Caspase-9、TGF-β蛋白相对表达和 α-SMA 蛋白相对表达均显著升高(P<0.05),静息通气量、气道阻力 改变和肺容积变换显著降低(P<0.05)。 相比空白转染组,miR-128-3p沉默组miR-128-3p表达、气道阻力、IL-6含量水平、iNOS含量水平、TNF-α含量水平、肺组织细胞凋亡率、cleaved cas3 / Caspase-3、cleaved cas9 / Caspase-9、TGF-β蛋白相对表达和α-SMA蛋白相对表达均显著降低(P<0.05),静息通气量、气道阻力改变和肺容积变换显著升高 (P<0.05)。

　　结论    下调miR-128-3p可以缓解脓毒症大鼠急性肺损伤,其作用机制可能与降低大鼠体内炎症反应并抑制肺组织细胞的凋亡相关。