目的 通过对9d不可预期应激刺激干预后大鼠的观察,分析不可预期应激刺激对胃肠道免疫系统和微生物种群的影响,为慢性应激对胃肠道功能的研究提供参考。
方法 24只SD大鼠随机分为空白组和慢性应激模型组。 模型组大鼠连续9d接受不可预期应激刺激。 造模完成后随机选择5只正常组和模型组大鼠,采集其粪便样本进行肠道微生物多样性分析。 两组各12只大鼠中,随机选取4只进行灌流固定,取胃窦、结肠组织进行形态学观察;其余8只大鼠取血浆和肾上腺组织检测其中皮质酮的含量。
结果 (1)9d不可预期应激刺激后,模型组大鼠9d体重增值与正常组大鼠相比明显减少(P=0.001),模型组大鼠肾上腺组织中皮质酮含量与正常组大鼠相比明显降低(P=0.006);模型组大鼠血浆中皮质酮含量与正常组大鼠相比增加(P=0.025)。(2)9d后模型组大鼠的胃黏膜层上皮细胞排列较正常组稀疏,其厚度与正常组相比减少(P=0. 034);模型组大鼠的胃黏膜固有层中性粒细胞数量与正常组相比减少(P=0.016);模型组大鼠的结肠黏膜中中性粒细胞数量与正常组相比增多 (P=0.013)。 3)经过 9 d 慢性不可预期应激,Alpha多样性分析显示,模型组大鼠粪便样本OTU中细菌种类与正常组大鼠相比明显增加(P=0.001);其中模型组大鼠样本中脱硫弧菌科和螺杆菌科的占比为与正常组大鼠相比增加 (P= 0.011,P= 0.047);模型组大鼠样本中类杆菌科的占比与正常组大鼠相比明显减少,差异具有极显著的统计学意义(P= 0.001)。
结论 9d不可预期应激刺激可以造成一个稳定的慢性应激大鼠模型,慢性应激所导致的免疫抑制与大鼠肠道微生物菌群失调伴随发生。