动物造模,骨髓间充质干细胞,药效评价 中国实验动物信息网 2024-07-03 381

　　目的：研究脂肪干细胞（ASCs）向内皮分化的能力，并与骨髓间充质干细胞（BMSCs）对比。

　　方法：从SD大鼠中分离培养ASCs、BMSCs，选择生长良好的一定代数的细胞，流式细胞仪鉴定细胞表面标志物；用CCK-8 法绘制细胞生长曲线；进行标准内皮诱导3 周，用qPCR 检测内皮细胞特异性标志物CD31、KDR、vWF mRNA的表达；免疫荧光染色观察表面抗原 CD31 的表达；用Dil 标记的乙酰化低密度脂蛋白（Dil-Ac-LDL）检测诱导组细胞的摄取功能；在Matrigel 上验证诱导组细胞的成管能力。

　　结果：成功分离培养大鼠ASCs和BMSCs，形态上，ASCs与BMSCs类似，均呈长梭形、纺锤状，类成纤维细胞样形态；流式检测结果显示BMSCs 与ASCs 均高表达间充质干细胞表面标志物CD29（100%与96.9%）、CD90（96.5%与 99.2%），低表达造血系细胞表面标志物CD45（3.9%与0.8%），证实所提取的是间充质干细胞；CCK-8 增殖实验结果表明， ASCs的增殖速度比BMSCs的增殖速度快（P<0.05）。标准内皮诱导后，qPCR显示诱导组BMSCs和ASCs表达CD31、KDR、 vWF mRNA水平均高于未诱导组（P<0.05）；免疫荧光染色显示CD31 抗原表达在诱导组的细胞膜表面；荧光显微镜下诱导组细胞摄取Dil-Ac-LDL（未诱导组不摄取）；诱导组细胞在Matrigel 上均具备成管能力，证实诱导后的细胞为内皮细胞。

　　结论：表明BMSCs和ASCs 均可诱导向内皮细胞分化，ASCs 广泛分化为内皮细胞的时间更短且增殖能力更强，提示ASCs 比 BMSCs更具有应用前景。