目的: 通过对SD雌鼠阴道涂片进行染色,观察细胞形态,为确定大鼠动情周期的四个阶段寻找一 种简便的染色方法。
方法: 将20只年龄10~13周,体重216~234g(225±6g)的SD雌鼠随机分为两组(每组10 只),每天做阴道涂片连续6天。 用湿润的棉签插入雌鼠阴道0.5~1.0cm轻转1~2圈,涂在滴有生理盐水的干净 载玻片上,自然风干后行快速革兰氏染色和结晶紫染色,在光镜下区分雌鼠发情周期。
结果: 结晶紫染色将细胞 核染成深紫色,细胞质为淡紫色,白细胞为深紫色。 快速革兰氏染色将细胞核染色为紫红色,细胞质为玫红色,白 细胞为深红色。 SD雌鼠动情周期平均为4~5天,分为发情前期、发情期、发情后期和发情间期四个阶段。 发情前 期,主要是有核上皮细胞;发情期,几乎都是无核角化细胞,可成簇状;发情后期,可见大量白细胞和少量无核角化 细胞;发情间期,白细胞,有核细胞和无核角化细胞同时存在,以白细胞为主。 两种染色方法操作过程都比较简单, 可以区分SD 大鼠动情周期的四个阶段,结晶紫染色细胞形态有时会有轻微变形,快速革兰氏染色细胞形态完整, 图像清晰,而且无需用无水乙醇固定用时较短。
结论: 快速革兰氏染色法在不改变SD雌鼠生殖周期的情况下能 够简单、快速的区分其动情周期的各个阶段,在进行大样本实验时,可以推广。