动物造模 中国实验动物信息网 2022-11-28 1480

　　目的：制备鸭抗原处理相关转运体(TAP)特异性单抗,为深入利用实验鸭开展免疫学研究提 供实验材料｡

　　方法：利用大肠埃希菌诱导表达主要组织相容性复合体(MHC)单倍型 HBW-SPF鸭 TAP 蛋白 肽结合区片段,表达产物经镍柱纯化后免疫BALB/c小鼠,采用 ELISA 技术筛选特异性单抗分泌杂交瘤细胞 株｡ 将阳性细胞株制备小鼠腹水,作为一抗,与多次截短表达 TAP 蛋白肽结合区进行蛋白免疫印迹试验,鉴 定单抗针对的抗原表位｡ 通过间接免疫荧光试验比较该单抗对实验鸭和鸡外周血淋巴细胞的反应性,利用 免疫组织化学技术检测对 SPF鸡､SPF鸭､鹌鹑､鹅和 SPF 猪的特异性｡

　　结果：获得一株鸭 TAP 单抗 1A6, 抗原表位位于297NARHQMLQQAVLDATAGTGMVVQEAI322,对鸡和鸭外周血淋巴细胞具有免疫荧光反应性;在鸡和 鸭的肠黏膜固有层检测到大量特异性信号,在猪､鹌鹑和鹅没有检测到信号｡

　　结论：获得了一株具有鸡和鸭反应 性的抗原转运相关体特异性的单抗,可运用于禽类实验动物在禽病学和禽免疫学方面的研究｡