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【动物造模】-小鼠神经系统中蛋白质降解通路调控分子的表达和分布

  目的 探讨细胞蛋白质降解通路调控分子在小鼠神经系统中的表达和分布情况。

  方法 以6周龄野生型C57BL/6J 小鼠眼、脑、脊髓、坐骨神经和肌肉组织为材料,采用蛋白质印迹法检测不同组织、解剖部位和亚细胞结构中蛋白质降解通路相关蛋白的分布和表达差异。

  结果 蛋白质降解通路相关蛋白组织蛋白酶D(Cathepsin D)、溶酶体关联膜蛋白2(lysosomal- associated membrane protein 2,LAMP2)、自噬微管相关蛋白轻链3A/B(microtubule-associated protein 1A/lB-light chain 3,LC3A/B)、自噬相关蛋白3(autophagy-related protein 3,Atg3)、 Ras相关GTP结合蛋白7(Ras-related GTP-binding protein 7,Rab7)、钙蛋白酶(Calpain)大小亚基以及钙蛋白酶抑制蛋白(Calpastatin)在小鼠眼、脑、春髓和肌肉中均有分布,但表达水平有一定差异。与小鼠脊髓相比,坐骨神经中Calpastatin 含量没有明显差异(P>0.05),但泛素、Cathepsin D、LAMP2、LC3A/B、Atg3、Rab7、Calpainl大亚基含量明显减少(P< 0.05),Calpain 小亚基含量明显增加(P<0.05)。

  结论 生理条件下泛素-蛋白酶体系统和自噬系统在细胞中广泛存在,且在神经元中其主要发生于胞体; 而Calpain 系统中剪切型 Calpain 小亚基的含量在轴突束中相对较高,这提示在神经元轴突中 Calpain降解通路可能发挥主要功能。

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