动物造模,骨髓间充质干细胞 中国实验动物信息网 2022-03-31 502

　　目的：探讨加味丹参饮体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的实验研究。

　　方法：采用贴壁法获取大鼠BMSCs，流式细胞术检测细胞表面抗原。MTT法检测加味丹参饮对BMSCs*大无毒浓度，用第3代细胞分组诱导：正常对照组，加味丹参饮组，5-氮胞苷组，加味丹参饮+5-氮胞苷组，应用western blot检测各组细胞结合蛋白（Desmin），α-肌球蛋白重链（α-MHC），心肌肌钙蛋白T（cTnT）蛋白表达，RT-PCR法检测各组细胞GATA-4，缝隙连接蛋白43（CX43）及Nkx2-5 mRNA表达。

　　结果：大鼠BMSCs表面CD90阳性率高于95%，CD34及CD45阳性率低于5%。加味丹参饮对BMSCs*大无毒浓度为0.625 g/L。与正常对照组比较，加味丹参饮组，5-氮胞苷组，加味丹参饮+5-氮胞苷组中Desmin，α-MHC及cTnT蛋白表达量上调，GATA-4，CX43及Nkx2-5 mRNA表达量上调，差异有统计学意义（P<0.01）。与加味丹参饮组或5-氮胞苷组比较，加味丹参饮+5-氮胞苷组中Desmin，α-MHC及cTnT蛋白表达量上调，GATA-4，CX43及Nkx2-5 mRNA表达量上调，差异有统计学意义（P<0.01）。

　　结论：加味丹参饮能够诱导BMSCs向心肌样细胞转化，与5-氮胞苷联合给药具有协同作用。