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转基因动物的基因型该怎么分析和命名?

  显微注射后出生的动物幼仔,需要尽快分析鉴定转基因阳性的动物。确定含有转基因的原代动物称为转基因始建系(founder)。然后,将始建系与所需遗传背景的野生型动物交配,建立稳定的转基因系(transgenic line)。繁殖转基因动物品系并测定转基因表达水平和分析表型变化。通常用PCR反应鉴定转基因动物基因型。转基因拷贝数需要用 Southern blotting分析法加以测定。由于转基因以多拷贝随机插入基因组,PCR反应难以鉴定出转基因是纯合子还是杂合子;用动物交配的方法可以确定纯合子和杂合子。如,将转基因动物与野生型动物交配,如果出生的后代全部有转基因,表明转基因动物为纯合子;如果只有50%的阳性后代,表明原始的转基因动物为杂合子。

  转基因动物技术的迅速发展和广泛应用,产生了大量各种转基因动物,如何命名就显得非常重要。转基因小鼠的命名主要根据小鼠基因组信息学库(The Mouse Genome Informatics Database,MGI)(http://www.informatics.jax.org/)制定的规则。MGI库有小鼠基因、位点和品系正式名称(official name)的正式资料。

  现在以HLA-A2.1转基因小鼠为例说明转基因小鼠的命名系统(图3-6)。

  动物种类:首先标示小鼠的种类,如129、 C57BL/6和BALB/c,表明其遗传学背景。Tg为转基因动物的标示。转基因名称:插入外源基因的正式名称。由研究者自行命名,用转基因显著特征的基因符号表示,外面加圆括号。首建鼠号码:显微注射后通常会得到多个新生小鼠,其编号为转基因小鼠的号码。实验室代码(ILAR code):从事转基因动物研究生产的实验室的实验注册代码。

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