动物造模 中国实验动物信息网 2022-10-22 776

　　目的： 制备小鼠MHV、LCM、ECT和HANT液相芯片，建立转基因小鼠传染病抗体的xMAP多重检测方法。

　　方法： 将荧光微球分别与小鼠MHV、LCM、ECT和HANT蛋白进行偶联，并且对*佳蛋白偶联量、检测抗体*佳工作浓度和Streptavidin-PE*佳工作浓度进行优化，制备小鼠MHV、LCM、ECT和HANT液相芯片，对56个转基因小鼠血清样品、阴性血清、阳性血清和质控血清进行xMAP多重检测。并应用传统的ELISA方法对xMAP检测结果进行验证。

　　结果： 1）小鼠MHV、LCM、ECT和HANT蛋白的*佳偶联量分别为20 μg、20 μg、40 μg和20 μg，检测抗体*佳浓度分别为2 μg/mL、2 μg/mL、2 μg/mL和4 μg/mL；Streptavidin-PE抗体*佳浓度均为2 μg/mL；（2）xMAP检测结果显示，14号、23号、55号和56号转基因小鼠血清MHV MFI值和index值均高于质控血清，其余小鼠血清的MFI值和index值均低于质控血清，表明14号、23号、55号和56号转基因小鼠MHV抗体阳性，其余小鼠MHV、LCM、ECT和HANT抗体阴性；（3）ELISA检测结果显示，14号、23号、55号和56号转基因小鼠MHV A450值和index值均高于质控血清，其余小鼠血清的A450值和index值均低于质控血清，表明14号、23号、55号和56号转基因小鼠MHV抗体阳性，其余小鼠MHV、LCM、ECT和HANT抗体阴性，该ELISA检测结果与xMAP检测结果相一致。

　　结论： 建立的xMAP多重检测技术可应用于转基因小鼠的传染病检测。