目的: 水貂阿留申病、病毒性肠炎与犬瘟热并称影响水貂健康的三大疫病,拟建立一种可同时检测三种病毒的多重PCR检测方法。
方法: 针对三种病毒基因保守区分别设计了3对特异性引物,对貂阿留申病毒(ADV)和水貂肠炎病毒(MEV)的DNA模板和犬瘟热病毒(CDV)的RNA模板进行了多重PCR扩增和扩增条件优化。
结果: PCR可同时扩增出601 bp (ADV)、205 bp (MEV)和451 bp (CDV)的特异性目的条带,敏感性试验表明*低核酸检出量为ADV每微升2.67×104拷贝、MEV每微升3.02×104拷贝和CDV每微升1.72×105拷贝。临床样品检测结果表明多重PCR和单一PCR检测结果一致。
结论: 建立的多重PCR检测方法可快速地检测ADV、MEV和CDV单一或混合感染的临床样品。