动物造模 中国实验动物信息网 2024-01-18 1472

　　目的：建立分离纯化非肥胖性糖尿病（NOD）小鼠胰岛的方法，并对其体内外生物学特性进行研究。

　　方法：采用改良的胶原酶消化结合Ficoll密度梯度离心方法，分离纯化NOD小鼠胰岛。应用体外糖刺激实验检测分离纯化的胰岛功能，以及通过监测移植小鼠的血糖、体重变化及糖耐量实验对移植胰岛的体内生物学功能进行分析，并通过HE染色和免疫荧光染色检测肾被膜下移植胰岛的存活情况。

　　结果：胰岛产率为（116±12）个胰岛／胰腺，纯度＞90％。体外糖刺激实验结果显示，NOD小鼠胰岛的糖刺激胰岛素释放水平明显低于KM小鼠胰岛。胰岛移植实验显示，移植胰岛能有效改善糖尿病小鼠的血糖、体重和糖耐量，但改善作用一般仅能维持2周左右。HE染色和免疫荧光染色结果显示，肾被膜下可见胰岛素阳性的胰岛细胞团，并且在残存的移植胰岛细胞团周围存在大量淋巴细胞浸润。

　　结论：通过改良的小鼠胰岛分离方法可由NOD小鼠分离得到大量较高纯度的胰岛，可用于今后探索如何阻断自身免疫损伤保护移植胰岛的研究。