目的:建立B超引导下安全有效的猕猴活体穿刺以获取肝脏、肾脏样品的方法。
方法:4只猕猴,雄性,8~12kg,10 ~12岁,经5~10mg/kg肌肉注射氯胺酮进行麻醉,麻醉后将其保定于手术台,侧仰卧位,于腹肋间区域、侧腰部肋缘下腹部区域剃毛及常规碘伏消毒。安装B 超引导架于3.5Hz 彩色电脑声像仪探头上,于猕猴右上腹肋间区域、侧腰部肋缘下腹部区域进行探查寻找所要穿刺的肝脏或肾脏器官,MyLab 30CV B超进一步调节探头位置以便确认目标,注意避让门静脉及下腔静脉等大血管,将活检枪的射程调为15 mm,将穿刺针在穿刺引导架的引导下垂直经皮肤插入腹部约1 cm,观察B 超实时影像,使穿刺目标与穿刺针位置在引导线内,即穿刺目标与穿刺针为垂直部位,按动穿刺枪扳机按钮进行穿刺,穿刺后迅速拔出穿刺针。将所获得的肝、肾组织进行RNA 提取。
结果:每只动物每次穿刺均获取的肝或肾组织样品量经换算约13 mg,提取的RNA 纯度高、完整性好,本法操作快速、可靠、安全,所有实验猴术后恢复良好,无大出血及死亡。
结论:本方法对建立超声引导下安全、有效获取恒河猴肝、肾组织样本,有着非常重要的意义。本方法能降低研究成本,并提高实验室非人灵长类动物的生活质量和动物福利,同时保证实验结果的准确性。