动物模型,骨神经 中国实验动物信息网 2020-08-13 892

　　实验原理青蛙或蟾蜍和其他两栖动物具有与温血动物相同的基本生命活动和生理功能，并且它们的孤立组织的生活条件易于掌握。在仁溶液的渗透下，神经肌肉制剂可以保持很长时间的生理活性，因此青蛙或蟾蜍坐骨神经腓肠肌分离物表现出神经肌肉兴奋性，兴奋性过程和骨骼肌收缩特性。常用于生理实验中观察。

　　手术青蛙手术器械和药品套装：青蛙板1个，小玻璃板1个，粗剪刀1个，直剪刀1个，大镊子1个，小镊子1个，眼科剪刀1个， 1个探针，2个玻璃微针，1个大烧杯，1个小烧杯，1个滴管，1个培养皿，棉线，Ren's溶液，锌铜叉。

　　1.破坏大脑和脊髓：取出蟾蜍并用自来水冲洗。用左手握住蟾蜍，用食指压住头的前部使头向前弯曲，用右手握住青蛙的针头穿过脑孔，向前刺头骨腔，左右搅动以破坏脑组织，然后将青蛙针拔出至脑孔。退出后，尖端旋转并插入到椎管中，这会破坏脊髓，但是当插入椎管时，蟾蜍的后肢会迅速失去张力，并发生尿失禁。当大脑和脊髓完全被破坏时，蟾蜍的四肢下垂，呼吸停止。

　　2.切掉上肢和内脏：用剪刀在sa关节处切开脊柱0.5-1.0厘米。用镊子固定脊柱，用剪刀沿所有内部器官和脊柱的两侧切开头部和胸部，使后肢，骨，脊柱和坐骨神经靠近脊柱的两侧。

　　3.剥皮：使用镊子或用左手直接捏住脊柱残端（注意不要挤压神经），用右手捏住残端的皮肤，并剥去后腿上的所有皮肤。将标本放在培养皿中的Ren溶液中。在继续下一步之前，请洗手和用过的设备。

　　4.释放腿部：使用玻璃微针沿着脊柱的两侧释放两条坐骨神经，在脊柱附近绑一条细线，并在领带和脊柱之间切开神经。去做。在神经上用细线将两个坐骨神经放在两个大腿上，用左手握住脊柱，倾斜骨，并切断所有下脊柱。以相反的方向捏住两侧的骨，去除耻骨联合，沿着耻骨联合的中心切开两个下肢，将一只腿浸泡在Len的溶液中，另一只腿浸泡在Len的溶液中。放在浸入的玻璃板上。上。

　　5.坐骨神经分离和股骨横断：识别坐骨神经沟和腓肠肌的位置，用剪刀剪开梨状肌和周围结缔组织，并用左手剪开神经细线。用剪刀或玻璃微针沿着坐骨神经的凹槽握住右手，小心地去皮，直到坐骨神经脱离the窝。在小腿上放置一条干净的坐骨神经，沿着膝盖关节切开股骨的所有肌腱，用剪刀剪断下股骨的附着肌肉，在上股骨的1/3股骨上。切断附着的肌肉。一种被称为坐骨神经结节。

　　6.释放腓肠肌：以坐骨神经小腿为样本，用剪刀剪下跟腱的下端，在跟腱与肌肉的连接处打细线，用左手握住线，并用剪刀剪用右手将腓肠肌释放到膝盖关节。*后，用粗剪刀剪出膝盖以下的小腿，留下坐骨神经和腓肠肌的样本。将准备好的标本用锌铜叉的杆轻轻地触摸到坐骨神经。腓肠肌立即收缩表明标本具有良好的兴奋性。接下来，将样品放入Len溶液中并稳定兴奋性，然后再进行实验。

　　1.从皮肤上取下的组织应避免接触皮肤毒物和其他杂质。

　　2.分开神经时，必须使用玻璃微针，并且不能使用刀或剪刀对其进行操作。

　　3.不要用力拉神经，以免造成伤害。

　　4.在样品制备期间，用Ren's溶液正确润湿样品。

　　5.请勿用手指或任何金属设备触摸或握住标本的神经肌肉部分。