动物实验 中国实验动物信息网 2020-08-13 1219

　　莫里斯水迷宫关于情绪行为和学习记忆的野外实验，大鼠研究引起了国内外学者的关注。临床研究表明，早发性高热惊厥与以后的生活有特定的联系。实验已经证实，高热惊厥会引起未成熟的大脑海马神经元变性和坏死，从而导致细胞器和突触的病理性超微结构改变。作者使用热水浴方法建立了高热惊厥的大鼠模型，并研究了高热惊厥对大鼠情绪行为，学习和记忆能力的影响。

　　1对象和方法

　　1.1受试者36天21天大的雄性SD（Spraque2Dawley）大鼠（由西安交通大学实验动物中心提供），体重（50±5）g，随机数法均分每组中有12只大鼠属于性惊厥组（FS），发烧对照组（FG）和正常对照组（NG），每组在标准环境中使用免费食物和水。提出来了。

　　1.2方法1.2.1建立高热惊厥模型用热水浴方法建立高热惊厥大鼠模型。 FS组老鼠放在透明的玻璃圆筒中（直径10厘米，高50厘米），圆筒的底部有许多小孔与外部连通。将圆筒放在恒温（45.0±0.25）°C的水浴（100 cm x 70 cm x 50 cm）中，并在玻璃圆筒的底部放置橡胶垫圈以调节圆筒中水的高度。当老鼠沿着管壁站立时，只有脖子露出来。每只大鼠使用这种方法在早上和下午一次诱发癫痫发作，共10次，共5天。观察癫痫发作的发生并记录癫痫发作的潜伏期（在大鼠进入水中之前，在水中发作惊厥，记录单位为分钟），水平和持续时间（在大鼠发作至发作结束之间的时间）。间隔，记录单位为秒）。以相同的方式将FG组中的大鼠浸泡在沸水中2分钟而不会发作。G组不执行处理。惊厥的程度参照W Jiang等的标准。 0级表示无抽筋，1级表示面部抽筋，2级点头，3级抽筋，4级全身僵硬，5级全身滋补间隔。 ..

　　1.2.2 openfieldtest（OFT）型号：XR-XZ301（由上海新阮信息技术有限公司开发）将60cm x 60cm x 60cm裸露木箱的底部分成36个小方块。将完成惊厥十次的大鼠放在板条箱底部的中心，记录其在5分钟内通过的格数，后肢站立时间数和排泄的粪便数。评分标准如下。在相邻网格中身体大于1/2的大鼠的总得分为1分，而后肢站立的得分为1分。该研究认为，经过的网格数量得分反映了动物的兴奋性。站立的后腿的数量代表大鼠适应陌生环境的能力。排泄的粪便数量表示大鼠劳损。

　　1.2.3被动回避测试（PAT）SFK2Ⅰ型避光测试箱（日本制造）在两个房间之间有两个不同的房间，一个是明亮的房间，另一个是黑暗的房间。有一扇小门穿过。立即将大鼠电击（3 mA，50 Hz），然后被动逃逸到安全，明亮的房间中。如果您5分钟未进入暗室，则认为您的学习已完成。经历10次高热惊厥后，记录大鼠在研究完成之前意外进入暗室的次数。这在很大程度上反映了大鼠*近的学习能力。 24小时后，回到明亮的房间并进行记录。老鼠从明亮的房间进入暗室的时间是记忆潜伏期，主要反映了老鼠*近的记忆能力。

　　1.2.4莫里斯水迷宫测试（Morriswatermazetest，MWMT）莫里斯水迷宫模型：XR-XM101（由上海新阮信息技术有限公司开发）是一个圆形池（直径130cm，高50cm），照相机，以及运行分析系统（微机和软件）。圆形水面由两条虚拟的垂直线划分为四个象限，这些垂直线穿过圆心。测试前一天，让大鼠在游泳池中自由游泳2分钟以适应环境。测试时间为4.5天。将一个圆形透明平台（直径10厘米，高28厘米）放置在该象限的一个水上区域。该平台隐藏在水面以下2 cm处，水温保持在大约24°C。该试验每天早晨和下午进行四次，每只大鼠在每个象限的中点随机进入壁一次。入水后，老鼠尽其所能逃避洪水，并在找到平台后生活在那里。图像采集和分析系统会自动记录逃生潜伏期，以便老鼠找到平台。如果在120秒内未找到平台，则操作员将大鼠引导至平台，休息4秒，然后将潜伏期记录为120秒。将每只大鼠在早晨和下午四次运动的平均值作为周期值（I2 IX节）进行分析。野外实验和莫里斯水迷宫对大鼠情绪行为，学习和记忆的影响1.3统计处理所有测量数据均表示为... x±s。根据数据的性质，进行方差分析，检验水平为α= 0.05、

　　2结果  2.1发生高热惊厥所有FS组均诱发高热惊厥，共抽搐120次，无死亡。 5、4、3、2和1级的癫痫发作数量（和百分比）分别为89（74.0％），5（4.6％），20（16.5％），4（3.5％）和2（1.4％）。 ％），发作潜伏期为（4.02±0.76）分钟；发作持续时间为（1.01±0.53）分钟。

　　2.2野外测试中的情绪行为变化FS组的随访评分*低（37.48±7.09），后肢站立次数*低（12.11±4.41），且粪便在5分钟内排泄。数量*多（10.62±2.32））; FS组遍历得分（q = 4.72、4.18; P\u003c0.01），后肢站立次数（q = 5.12、4.85; P\u003c0.01），和粪便颗粒的数量（NG =与FG组相比）q = 5.33,5.02； P\u003c0.01）和其他方面都很重要。此外，NG组和FG组之间的差异在排泄的粪便数量上也非常显着（q = 3.17，P\u003c0.05）。

　　2.3黑暗回避测试当FS组的大鼠达到学习水平时（4.02±1.29），其学习和记忆的变化是错误*多的，与NG和FG组相比，差异非常显着。它是（q = 6.24,5.31; P\u003c0.01）。 24小时后，FS组大鼠的记忆潜伏期*短（169.71±103.22），与NG和FG组的大鼠有显着差异（q = 5.69,5.28; P\u003c0.01）。结果表明，反复的高热惊厥可损害大鼠的短期学习和记忆能力。

　　2.4莫里斯水迷宫测试中空间学习能力的变化FS组大鼠在莫里斯水迷宫中发现隐藏平台的能力表现为很长的逃避潜伏期，大鼠空间学习中反复出现高热惊厥。这表明这可能会削弱能力；方差分析表明，FS组与NG和FG组的逃避潜伏期有很大差异（F = 152.46、P\u003c0.01）  3讨论 由于起病的临床表现，高热惊厥是儿科*常见的紧急情况之一、突然，严重且对家庭和社会造成不利影响。高热惊厥是否会损害孩子将来的情绪行为，学习和记忆是学术界关注的问题。

　　3.1高热惊厥动物模型的科学性质在该实验中，使用热浴法建立了高热惊厥模型，并对实验设置进行了修改，以使高热惊厥组中的所有大鼠均有不同程度的惊厥。我试图诱导。在先前的文献中，大鼠溺水的可能性增加。通过改进实验装置（底部为空的玻璃圆柱），大鼠的粪便不太可能排入水族箱，从而确保了实验的清洁卫生。与其他模型相比，高热惊厥模型的建立是一种理想的实验方法。

　　3.2高热惊厥对情绪行为，学习和记忆的影响。实验发现，在野外试验中，FS组大鼠的兴奋性降低，从而降低了它们适应新环境的能力。同时，它们容易产生紧张和不良反应；避黑试验结果表明，反复的高热惊厥可能会降低大鼠的短期学习和记忆能力。 ..莫里斯水迷宫是英国心理学家莫里斯设计的一种理想设备，可以反映小型啮齿动物的空间学习和记忆能力。它可以用作对由于疾病和压力而受损的人类学习和记忆的比较研究。莫里斯水迷宫FS组大鼠的逃避潜伏期显着延长，反映了大鼠的空间学习能力受损。以上结果表明，与以前的研究一样，反复的高热惊厥可损害大鼠的情绪行为，学习和记忆。

　　3.3一种可能的高热惊厥机制，会影响情绪行为以及学习和记忆。反复发热性癫痫发作导致大鼠情绪行为受损以及学习和记忆的机制尚不清楚。在先前的研究中，反复的高热惊厥导致海马结构发生变化，包括海马神经元变性和坏死，突触形态改变（突触间隙异常扩大）以及海马中苔藓成纤维细胞形成异常。已知会发生病理变化。而且，异常的突触连接，异常的分布和NMDA（N2甲基2D天冬氨酸）受体的表达与学习和记忆以及异常的信号通路密切相关。海马结构属于古代皮质，是边缘系统的重要组成部分。由海马和丘脑前核，椎板核，下丘脑乳头状丘脑和扣带回组成的环是调节行为，学习和记忆以及情绪反应的重要神经解剖学基础。因此，以上关于海马结构和功能变化的发现可能是解释由反复发作的高热惊厥引起的大鼠情绪行为和学习记忆能力受损的重要部分。但是，这些过程与它们影响脑功能障碍的程度之间的关系需要进一步研究。