动物造模 中国实验动物信息网 2022-03-09 1424

　　目的:探索一种简单､易行的体外快速､分离培养树鼩角膜基质细胞的方法｡

　　方法:实验分为实验组A和实验组B,取树鼩角膜基质层,实验组A剪碎,用1% 的Ⅱ型胶原酶消化60min, 离心后重悬接种;实验组B用Ⅱ型胶原酶联合中性蛋白酶消化｡ 比较记录原代及传代细胞生长情况､传代时间,细 胞行波形蛋白免疫组化及免疫荧光鉴定｡

　　结果:胶原酶消化法可成功的获取原代细胞,9d后即可进行传代,细 胞形态好;传代细胞生长较快,2~3d即可传一代;双酶消化法获得的CSCs较少,10d才可见少量散落细胞,15~ 20d可传代;波形蛋白免疫组化及免疫荧光表达阳性｡

　　结论:两种方法均可成功培养出CSCs,但胶原酶消化法能 更容易高效分离培养出大量树鼩CSCs｡