目的:繁殖和鉴定 Mfge8基因敲除C57BL/6小鼠,获取纯合子(Mfge8-/-)小鼠,并比较 Mfge8-/-小 鼠血清学及组织学改变。
方法:对幼鼠剪尾抽提基因组DNA,用PCR法和琼脂糖凝胶电泳法鉴定幼鼠基因型;利 用TUNEL法分别检测12周龄野生型(WT)和 Mfge8-/-小鼠肺组织中凋亡细胞;并且利用免疫荧光法分别检测36 周龄WT和 Mfge8-/-小鼠血清中ANA和AECA含量。
结果:构建的基因敲除小鼠已成功繁育保种,并得到纯合基 因缺失型小鼠。 同时,12周龄Mfge8-/-小鼠肺组织中凋亡细胞数量明显多于WT小鼠;36周龄Mfge8-/-小鼠血清中 ANA抗体及AECA抗体阳性,而WT小鼠血清中呈现阴性。
结论:C57BL/6背景小鼠敲除 Mfge8基因后,更易发 生自身免疫疾病。