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【动物造模】-大鼠胚胎内注射hUCMSCs在肝内存活和肝分化研究

  目的   观察大鼠胚胎期注射绿色荧光蛋白(GFP)标记的人脐带间充质干细胞(GFP-hUCMSCs)在 SD 大鼠肝中存活和肝分化,探索在胚胎发育期建立人-大鼠嵌合体肝的可行性。

  方法    运用携带绿色荧光蛋白的 慢病毒转染标记人脐带间充质干细胞,然后注射到实验组大鼠胚胎。胎鼠出生后,制作冰冻切片观察 GFP- hUCMSCs 在肝组织的迁移和分布,同时免疫组织化学法检测人相关蛋白在鼠肝内的表达。对照组注射等体积生理 盐水。

  结果    实验组胎鼠出生 45d、75d、120d 的肝组织内检测到 GFP 信号的分布,对应肝组织内可检测到人肝 细胞相关蛋白 ALB、HNF3β 和HNF4α 的表达,但 120d大鼠含量极少、部分甚至检测不到。对照组为阴性。

  结论    胚胎期注射 hUCMSCs 的胎鼠出生 75d 的肝内仍可检测到 GFP 信号的存在和人肝细胞相关蛋白 ALB、HNF3β 和HNF4α 的表达,且随时间延长而呈现逐渐减少的趋势。

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